一根色譜柱到了不可使用的時(shí)候應(yīng)更換。“不可挽救”這個(gè)概念在許多色譜工作者的認(rèn)識(shí)上不完全相同,,有人認(rèn)為只有當(dāng)色譜柱的壓力增高到系統(tǒng)不可承受的地步才考慮報(bào)廢,只要壓力在可接受的范圍內(nèi)總要設(shè)法修補(bǔ),,以延長色譜柱的壽命。另外也可以從分析高要求的樣品改作分析低要求的樣品,,從分離多組分的樣品改作分離單組分的樣品,,從分離介質(zhì)復(fù)雜的樣品改為分離介質(zhì)相對(duì)簡單的樣品。實(shí)驗(yàn)室最常用的延長色譜柱壽命的方法是修補(bǔ)柱頭,、換不銹鋼燒結(jié)片,,沖洗、倒沖柱,。
修補(bǔ)柱頭和換不銹鋼結(jié)片常聯(lián)系在一起,,前面已簡單作了敘述。去掉過濾片后發(fā)現(xiàn)柱頭塌陷或填料被污染,,可用無水乙醇調(diào)成糊狀的同種填料(挖去臟填料)填補(bǔ)柱頭,,用與柱內(nèi)徑相同的、頂端平而光滑的不銹鋼或聚四氟乙烯棒壓緊,,再填平,,再壓緊,反復(fù)3~5次,,最后用無水乙醇將柱頭四周潤濕幾次,,擦干凈柱外壁的填料、加上新過濾片,,擰緊接頭,,接上泵沖洗,而后再接檢測器,。如果塌陷很深,,或者挖去的臟填料很多,,填平柱頭后接上泵沖洗15min,再拆下柱填平,,再接上泵沖洗,,反復(fù)數(shù)次可恢復(fù)大部分柱效。有時(shí)還應(yīng)該用比較高的流速才能有效,。
修補(bǔ)過的色譜柱一般不能恢復(fù)到原先的柱效,,剛開始修補(bǔ)數(shù)次效果不錯(cuò),隨著修補(bǔ)次數(shù)的增多,,維持一個(gè)短時(shí)間又要修補(bǔ),,到了后期,鍵合相隨硅膠的溶蝕而流失,,加上化學(xué)物質(zhì)的腐蝕,,此時(shí)再也無法修補(bǔ)了。
對(duì)價(jià)格高的色譜柱一定堅(jiān)持自己動(dòng)手修補(bǔ),。如排阻色譜柱不隨時(shí)間而改變保留,,僅需比較低的分離條件,稍為修補(bǔ)就可解決問題,。
倒沖柱也是經(jīng)常采用的維護(hù)措施,,不提倡新色譜柱倒沖柱。色譜柱用到中后期,,而且修補(bǔ)過多次后才考慮逆向反沖,。可在倒沖柱前填平原柱頭的塌陷現(xiàn)沖洗,,也可倒向沖洗后再填平柱頭(原柱出口),,后者效果好一些。柱逆向使用后柱效損失較大(約40%~60%),,常??梢缘惯^來再倒過去,只要不破壞柱床,,效果還不錯(cuò),。倒沖柱前要檢查柱兩端的燒結(jié)過濾片情況,防止燒結(jié)過濾片(原柱頭承受過度壓力,,填料被泵打出),。
在采取以上措施時(shí),沖洗過程應(yīng)伴隨始終,。
有少數(shù)實(shí)驗(yàn)室自己裝色譜柱,,或請(qǐng)廠商裝柱。色譜柱硬件都是用過的舊柱,這可節(jié)約50%的經(jīng)費(fèi),,但有時(shí)也碰到一些麻煩,。柱內(nèi)壁未經(jīng)再拋光處理,柱壁效應(yīng)比較大,,分辨率降低,,或者拖尾峰。重裝柱后卡套易松動(dòng),,整個(gè)柱頭滲漏,。可借助于聚四氟乙烯軟膜密封,,但已不能承受較高的壓力,。
對(duì)有些色譜柱重新處理是值得的,但有些則無價(jià)值,。除考慮價(jià)格外,,還要考慮實(shí)際工作要求。任何色譜柱都可以修補(bǔ)數(shù)次,,樣品處理好,、流動(dòng)相溫和、壓力中下可以減少修補(bǔ)柱的次數(shù),。柱壓升高超過系統(tǒng)所承受的限度就要報(bào)廢柱,。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要備有不同類型的散裝填料(C18、硅膠),,用同類型、同粒度的填料修補(bǔ)柱頭效果好,。如果手頭沒有所要求的填料,,可以用其它填料代替,這比用柱頭塌陷的柱要好得多,。
修補(bǔ)柱頭和換不銹鋼結(jié)片常聯(lián)系在一起,,前面已簡單作了敘述。去掉過濾片后發(fā)現(xiàn)柱頭塌陷或填料被污染,,可用無水乙醇調(diào)成糊狀的同種填料(挖去臟填料)填補(bǔ)柱頭,,用與柱內(nèi)徑相同的、頂端平而光滑的不銹鋼或聚四氟乙烯棒壓緊,,再填平,,再壓緊,反復(fù)3~5次,,最后用無水乙醇將柱頭四周潤濕幾次,,擦干凈柱外壁的填料、加上新過濾片,,擰緊接頭,,接上泵沖洗,而后再接檢測器,。如果塌陷很深,,或者挖去的臟填料很多,,填平柱頭后接上泵沖洗15min,再拆下柱填平,,再接上泵沖洗,,反復(fù)數(shù)次可恢復(fù)大部分柱效。有時(shí)還應(yīng)該用比較高的流速才能有效,。
修補(bǔ)過的色譜柱一般不能恢復(fù)到原先的柱效,,剛開始修補(bǔ)數(shù)次效果不錯(cuò),隨著修補(bǔ)次數(shù)的增多,,維持一個(gè)短時(shí)間又要修補(bǔ),,到了后期,鍵合相隨硅膠的溶蝕而流失,,加上化學(xué)物質(zhì)的腐蝕,,此時(shí)再也無法修補(bǔ)了。
對(duì)價(jià)格高的色譜柱一定堅(jiān)持自己動(dòng)手修補(bǔ),。如排阻色譜柱不隨時(shí)間而改變保留,,僅需比較低的分離條件,稍為修補(bǔ)就可解決問題,。
倒沖柱也是經(jīng)常采用的維護(hù)措施,,不提倡新色譜柱倒沖柱。色譜柱用到中后期,,而且修補(bǔ)過多次后才考慮逆向反沖,。可在倒沖柱前填平原柱頭的塌陷現(xiàn)沖洗,,也可倒向沖洗后再填平柱頭(原柱出口),,后者效果好一些。柱逆向使用后柱效損失較大(約40%~60%),,常??梢缘惯^來再倒過去,只要不破壞柱床,,效果還不錯(cuò),。倒沖柱前要檢查柱兩端的燒結(jié)過濾片情況,防止燒結(jié)過濾片(原柱頭承受過度壓力,,填料被泵打出),。
在采取以上措施時(shí),沖洗過程應(yīng)伴隨始終,。
有少數(shù)實(shí)驗(yàn)室自己裝色譜柱,,或請(qǐng)廠商裝柱。色譜柱硬件都是用過的舊柱,這可節(jié)約50%的經(jīng)費(fèi),,但有時(shí)也碰到一些麻煩,。柱內(nèi)壁未經(jīng)再拋光處理,柱壁效應(yīng)比較大,,分辨率降低,,或者拖尾峰。重裝柱后卡套易松動(dòng),,整個(gè)柱頭滲漏,。可借助于聚四氟乙烯軟膜密封,,但已不能承受較高的壓力,。
對(duì)有些色譜柱重新處理是值得的,但有些則無價(jià)值,。除考慮價(jià)格外,,還要考慮實(shí)際工作要求。任何色譜柱都可以修補(bǔ)數(shù)次,,樣品處理好,、流動(dòng)相溫和、壓力中下可以減少修補(bǔ)柱的次數(shù),。柱壓升高超過系統(tǒng)所承受的限度就要報(bào)廢柱,。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要備有不同類型的散裝填料(C18、硅膠),,用同類型、同粒度的填料修補(bǔ)柱頭效果好,。如果手頭沒有所要求的填料,,可以用其它填料代替,這比用柱頭塌陷的柱要好得多,。