1.將按鈕壓至第二停點(diǎn)。

2.將吸頭浸入液面1cm處,，緩慢釋放按鈕使其滑回原位,。這將時液體充滿吸頭。將吸頭從液體中取出,，接觸容器邊緣去掉多余液體,。

3.放液到接收容器時平穩(wěn)地輕按按鈕至第一停點(diǎn),。保持在這個位置。一些液體會殘留在吸頭中不能被放出,。

4.殘留在吸頭內(nèi)的液體能夠被吹回原溶劑中或者同吸頭一起丟棄,。

5.松開按鈕到準(zhǔn)備位置。

    選擇合適的移液器對于微量移液的精準(zhǔn)性也很重要,，Thermo Scientific F系列移液器的超強(qiáng)吹出設(shè)計則滿足了微量移液對精準(zhǔn)性的需求,。低于50μl液程的Thermo F系列移液器均采用雙活塞設(shè)計，與其它普通移液器相比,，其空氣吹出能力增大50%-60%,，因此在小體積的液體吹出時會非常干凈完全，大大提高了移液的精準(zhǔn)性,。

    我們使用Thermo Scientific Finnpipette F2 1-10 μl移液器,，配合Thermo Scientific Finntip Flex 10吸頭，同時分別使用正向移液和反向移液,，移取1%牛血清白蛋白（BSA,，Sigma A7030）進(jìn)行移液精準(zhǔn)性測試,。

圖1 表明當(dāng)使用反向移液技術(shù)時,，移液量的變化比使用正向移液技術(shù)處于更狹窄的一個范圍。

圖2 表明使用兩種移液方式的不精確度,。不精確度是估量移液的重復(fù)性的,。反向移液技術(shù)可以使不精確度相對于正向移液技術(shù)降低50%。

    這是因?yàn)?，BSA溶液含有易被疏水移液器吸頭壁吸附的疏水成分,。當(dāng)使用正向移液技術(shù)時，每次移液后少量的液體易殘留在吸頭中,。這種趨勢會增加吹出液體體積之間的偏差,，因?yàn)楫?dāng)重復(fù)移液時吸頭中累積的殘余液體可能增加下一次移液的移液量。而反向移液技術(shù)中有額外的液體被吸入吸頭中,，這些額外的液體作用似一個蓄水池它使連續(xù)移液的移液量均等,。這個蓄水池也能阻止空氣在吹出液體的最后從吸頭口進(jìn)入，這樣可以降低液體起泡的可能性,。這使反向移液技術(shù)在移取小液量液體時尤其有用,。由此可見，選擇Thermo Scientific F2移液器,，同時配合反向移液技術(shù),，可較好的提高移取蛋白溶液的精確度和重復(fù)性。