在Abbott Cell-DYD 1600型血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用中,,血細(xì)胞分布直方圖具有直觀性,對(duì)分析病人標(biāo)本和對(duì)儀器狀態(tài)及性能都很有幫助,。
一,,白細(xì)胞分布直方圖
電阻法白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類的基本原理如下:在溶血素(Lyse)的作用下,白細(xì)胞在高滲和化學(xué)作用的共同影響下,,膜的透性增加,,細(xì)胞內(nèi)液逸出,而細(xì)胞核及細(xì)胞器卻不能通過(guò)胞膜,,皺縮的膜包裹細(xì)胞核及胞質(zhì)顆粒形成一個(gè)“溶血素作用后細(xì)胞”(lyse modified cell,,本文簡(jiǎn)稱為L(zhǎng)MC )。LMC 通過(guò)計(jì)數(shù)孔,,在孔的內(nèi)外有電場(chǎng)存在,,每一個(gè)大小不同的LMC 通過(guò)電場(chǎng)都產(chǎn)生一個(gè)與其體積成正比的電脈沖,通過(guò)對(duì)收集到的脈沖信號(hào)的分析,,從而計(jì)出細(xì)胞的數(shù)量,,并且能夠?qū)Π准?xì)胞跟據(jù)脈沖大小的分布計(jì)算出白細(xì)胞的分類(其實(shí)是LMC 的脈沖大小),。值得注意的是,,電阻法對(duì)白細(xì)胞的分類根據(jù)的是LMC 的體積,而不是根據(jù)生理狀態(tài)下的白細(xì)胞體積,。LMC 與生理?xiàng)l件下的體積分布對(duì)照如下:
1,,溶血素對(duì)各類白細(xì)胞的作用:
淋巴細(xì)胞:細(xì)胞體積小,胞核單一且較小,,胞漿量少,,胞質(zhì)顆粒少。經(jīng)溶血素作用后形成一個(gè)由胞膜緊緊裹在核上的LMC ,,體積在35~98fl,,CD1600在三分類上屬LYM。
嗜堿性粒細(xì)胞:細(xì)胞體積較小,,胞核單一且較小,,胞漿量極少,胞漿中有嗜堿性顆粒,。經(jīng)溶血素作用后形成一個(gè)由胞膜緊緊裹在核及上的LMC ,,體積在98~135fl,,CD1600在三分類上并入MID。
嗜酸性粒細(xì)胞:細(xì)胞體積較大,,胞核多為兩個(gè),,胞漿量較多,胞漿有較多的粗大嗜酸性粒顆粒,。經(jīng)溶血素作用后形成一個(gè)由胞膜裹在核及胞質(zhì)顆粒上的LMC ,,體積在98~135fl,CD1600在三分類上并入MID,。
單核細(xì)胞:生理狀態(tài)下,,細(xì)胞體積最大,胞核單一,,較大,,在三維空間上有折皺,胞漿量中等,,顆粒較少,。經(jīng)溶血素作用后形成一個(gè)由胞膜裹在核上的一個(gè)中等大小的LMC ,體積在98~135fl,,CD1600在三分類上并入MID,。
中性粒細(xì)胞:生理狀態(tài)下,細(xì)胞體積較大,,分葉核,,胞漿豐富,有大量中性顆粒,。經(jīng)溶血素作用后,,形成一個(gè)由胞膜核及中性顆粒上的LMC ,體積在135~350fl,,CD1600在三分類上屬GRAN,。
白細(xì)胞分布直方圖的模式:
白細(xì)胞分布直方圖是以“溶血素作用后細(xì)胞”體積為橫軸,以數(shù)量為縱軸,。橫軸分為256個(gè)通道,,每通道為1.37fl,收集到的相應(yīng)的脈沖數(shù)量在坐標(biāo)系中描點(diǎn),,從而繪出一條連續(xù)的曲線,。理想的白細(xì)胞曲線是由三個(gè)連續(xù)的正態(tài)分布形成的曲線,。
2,,白細(xì)胞的干擾“R”的分布。
類似于“R0 ,、R1 ,、R2 ,、R3 、R4及Rm”這樣的標(biāo)記經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)在CD1600的報(bào)告單的WBC計(jì)數(shù)及分類的數(shù)值結(jié)果旁邊,,這些R的標(biāo)記是對(duì)白細(xì)胞分布中的某些區(qū)域數(shù)值異常所進(jìn)行的提示,。具體R的分布見(jiàn)下圖:
3, 白細(xì)胞分類與計(jì)數(shù)中出現(xiàn)的異常情況:
3.1,, 中介值細(xì)胞區(qū)域出異常白細(xì)胞峰,。
3.2, 由大量白血病細(xì)胞出現(xiàn)形成的單一峰。
3.3,,由堵孔或半堵孔引起的干擾峰及判斷,。
由于計(jì)數(shù)用的寶石孔被蛋白質(zhì)塊、細(xì)胞碎片,、纖維,、結(jié)晶等堵塞或半堵塞,白細(xì)胞計(jì)數(shù)會(huì)出現(xiàn)非常嚴(yán)重的干擾,,表現(xiàn)為白細(xì)胞總數(shù)假性增高,,具體反映在直方圖上如下圖標(biāo)示,而在數(shù)值上,,淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)增高,,百分比加大,高達(dá)80%以上,,有R0, R1, R2, Rm提示出現(xiàn),。
3.3.1,出現(xiàn)下圖所示峰形一般再結(jié)合計(jì)數(shù)時(shí)間即可做出白細(xì)胞寶石孔堵孔的判斷,。
3.3.2 如果出現(xiàn)下圖所示峰形,,考慮到試劑質(zhì)量不高的情況下,測(cè)試嬰幼兒標(biāo)本時(shí),,從直方圖及數(shù)值上不易與半堵孔的情況區(qū)別,,一般也應(yīng)清洗機(jī)器后復(fù)查。
3.3 白細(xì)胞計(jì)數(shù)Count Over Range
二,,紅細(xì)胞分布直方圖
相對(duì)于白細(xì)胞的分布直方圖,,紅細(xì)胞分布直方圖就顯得簡(jiǎn)單和易于理解。同白細(xì)胞分布直方圖的原理相同,,橫軸為紅細(xì)胞體積,,縱軸則代表了數(shù)量。
橫軸分為256個(gè)通道,,每通道為1 fl,,收集到的相應(yīng)的脈沖數(shù)量在坐標(biāo)系中描點(diǎn),從而繪出一條連續(xù)的曲線,。理想的紅細(xì)胞曲線是一個(gè)正態(tài)分布的曲線,。
1, 下面的圖標(biāo)示了三種不同的RBC分布模式圖,。通過(guò)和正常RBC分布對(duì)照,當(dāng)出現(xiàn)小細(xì)胞或大細(xì)胞分布時(shí),,能直觀地辨別出來(lái),。
2, 下圖標(biāo)示是由不同紅細(xì)胞亞群引起一比較少見(jiàn)的特殊峰形:
3, 下圖標(biāo)示了某些情況下過(guò)高的WBC或PLT計(jì)數(shù)對(duì)紅細(xì)胞分布直方圖的干擾。
三,,血小板分布直方圖
血小板分布直方圖橫軸分為256個(gè)通道,,每通道為0.137 fl,收集到的相應(yīng)的脈沖數(shù)量在坐標(biāo)系中描點(diǎn),,從而繪出一條連續(xù)的曲線,。
1, 血小板分布直方圖的理想模式
2, 血小板分布直方圖的干擾情況
2.1,血小板受到體積極小的紅細(xì)胞影響,,會(huì)使PLT的計(jì)數(shù)假性增高,。
2.2,血小板受到靜電干擾,,會(huì)使PLT的計(jì)數(shù)假性增高,。
2.3,血小板在高值區(qū)域受到相關(guān)因素的影響,,使PLT的計(jì)數(shù)假性增高,。
關(guān)于Cell-dyn 1600血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞分布直方圖還有其它一些有用的信息,有助于我們對(duì)血常規(guī)結(jié)果有更好的理解,。
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