對于動物醫(yī)院和診所來說,,能夠在自己的醫(yī)院或診所立刻進(jìn)行動物專用血常規(guī)化驗(yàn)有很大的好處,。
益處包括:
□提高工作效率
在化驗(yàn)血常規(guī)的過程中,正確處理樣本對測試結(jié)果有著重要的影響,。如發(fā)現(xiàn)樣本有問題時(shí),,可馬上再次抽取樣本重新測試,,避免送出血樣本到外面的化驗(yàn)所時(shí),,才被發(fā)現(xiàn)樣本出現(xiàn)問題而耽誤時(shí)間,。
□提升測試準(zhǔn)確度
若要得出準(zhǔn)確結(jié)果,新鮮取得的全血樣本應(yīng)在4小時(shí)內(nèi)進(jìn)行血常規(guī)化驗(yàn)檢查(越早越好),。這樣避免了樣本送往外面的化驗(yàn)所時(shí),,因時(shí)間過長而引至血樣退化或變質(zhì),導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果,。
□提高經(jīng)濟(jì)效益
為診斷和治療提供及時(shí)的信息,,能立刻、全面地解答顧客的疑問,,以專業(yè)的素質(zhì)吸引高端顧客,。
整體來說,血液化驗(yàn)本身就存在很多挑戰(zhàn),。除了需要正確的樣本處理和維護(hù)儀器之外,如何證實(shí)各種儀器檢測的準(zhǔn)確度亦是一個(gè)難題,。
血常規(guī)化驗(yàn)(CBC)公認(rèn)的"黃金標(biāo)準(zhǔn)"技術(shù)包括繁重的手工操作,,而且需要相當(dāng)有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員才能獲得最精確的結(jié)果。白細(xì)胞(WBC)分類,,恐怕是血細(xì)胞分析中最難的問題,,在察看一張血片時(shí),即使是一個(gè)經(jīng)驗(yàn)豐富的顯微鏡技術(shù)人員,,通常的結(jié)果誤差也高達(dá)10%,。
人工察看顯微鏡片時(shí),在大量的細(xì)胞里進(jìn)行手工分類也是受限制的,。一般來講,,手工僅會計(jì)算100個(gè)白細(xì)胞,,而美國愛貝斯( Abaxis ) HMII全自動血細(xì)胞分析儀能計(jì)算成千上萬個(gè)白細(xì)胞,準(zhǔn)確和代表性亦大大提高,。
察看顯微鏡玻片時(shí),,經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員才有較高的準(zhǔn)確性,,且可辨認(rèn)出很多有關(guān)臨床的"主觀性":細(xì)胞群的存在(未成熟中性粒細(xì)胞常被自動分析儀當(dāng)作單核細(xì)胞),,向左/向右移位(如中性粒細(xì)胞),有核紅細(xì)胞(在紅細(xì)胞溶解后出現(xiàn),,被當(dāng)作白細(xì)胞),,未成熟的和病理細(xì)胞(經(jīng)常被錯(cuò)誤歸類),準(zhǔn)確的紅細(xì)胞形態(tài),,充足的血小板(特別是在貓的血樣里經(jīng)常見到巨大和凝集的血小板),,等等。
盡管專家和行業(yè)內(nèi)都一致推薦在鑒定和確認(rèn)時(shí)察看顯微鏡片,,特別是對于病情嚴(yán)重的動物,,但在今天繁忙的動物診所里的確很需要一臺又準(zhǔn)確、又方便,、又可靠的全自動動物專用血細(xì)胞分析儀,。
以下內(nèi)容介紹了現(xiàn)存的各種各樣的血常規(guī)化驗(yàn)方法,以及動物血樣的獨(dú)特性為什么會使得人用或不符合動物規(guī)格的所謂全自動檢測儀的精確性受到挑戰(zhàn),。
簡單地說,,定性白細(xì)胞方法(如美國IDEXX的QBC)使用專門的毛細(xì)管和染色,以細(xì)胞平均大小為基礎(chǔ)來估計(jì)血細(xì)胞數(shù)(因此,,稱為"定性"),。因?yàn)椴]有真正進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),對于正常,、健康的動物,,獸醫(yī)師們還能期待有相對準(zhǔn)確的結(jié)果,但對于生病的動物,,檢測結(jié)果是完全不可靠的,。
電阻法和激光流式細(xì)胞測量法是兩種比較成熟的自動檢測血細(xì)胞的方法。而一些制造商已成功地融合了這兩種技術(shù)于同一血細(xì)胞分析儀上,,但到目前為止這種融合的技術(shù)(如Advia 60,,Cell-Dyn 3500 )還沒有應(yīng)用在一臺動物血細(xì)胞分析儀上。
電阻技術(shù),,或所謂的"犁刀法"的工作原理是:當(dāng)不帶電的血細(xì)胞通過一個(gè)充了電的圓孔時(shí),,會產(chǎn)生一次"脈沖"。在某段時(shí)間內(nèi)一定量的血液里所測到的脈沖數(shù)即是細(xì)胞計(jì)數(shù),。測試時(shí)細(xì)胞導(dǎo)電性(強(qiáng)弱及密集程度)下降與細(xì)胞量成正比,。對細(xì)胞大小的識別能力,,以及對各種溶細(xì)胞素溶液的敏感性,區(qū)分開了基本的細(xì)胞類型(紅細(xì)胞,,白細(xì)胞,,血小板)。
美國愛貝斯( Abaxis ) HMII分析儀擁有正確的校準(zhǔn)并已取得各種不同種類的動物驗(yàn)證,,這二點(diǎn)為電阻法提供了非??煽康募?xì)胞計(jì)數(shù),血紅蛋白值和相關(guān)指標(biāo)結(jié)果,。白細(xì)胞分類的精確度取決于儀器的設(shè)計(jì)和專利的計(jì)數(shù)規(guī)則系統(tǒng)( proprietary algorithms ),。因?yàn)殡娮璺ㄍㄟ^兩種方法將細(xì)胞分類:
1) 對溶血素的敏感性
2)對細(xì)胞大小的敏感性
溶血這一步所用的時(shí)間和量(次數(shù)的調(diào)度),都對能否得到可靠的分類結(jié)果起到至關(guān)重要的作用,。性能優(yōu)越的美國愛貝斯( Abaxis ) HMII分析儀擁有一整套對應(yīng)不同動物種類的復(fù)雜方程式,,來準(zhǔn)確地辨認(rèn)和歸類不同種類的動物細(xì)胞,從而大大提升電阻法計(jì)數(shù)的精確度,。
激光法應(yīng)用的是流式細(xì)胞測量法來進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),,以及通過(鐳射)光散射來辨別和分類細(xì)胞。這種方法的好處是可以分析細(xì)胞內(nèi)部,,因而區(qū)分細(xì)胞的不同結(jié)構(gòu)(如粒性白細(xì)胞等),。多種染色方法的使用進(jìn)一步描繪出細(xì)胞的類型和鑒別細(xì)胞內(nèi)容物(如網(wǎng)狀細(xì)胞)。采用這類技術(shù)的有拜耳(Bayer)Advia系列(Advia 60結(jié)合了電阻法和流式細(xì)胞測量法,,Advia 120僅應(yīng)用了流式細(xì)胞測量法,,它可進(jìn)行動物血細(xì)胞分析)。Advia 120在獸醫(yī)方面的應(yīng)用表現(xiàn)出和手工方法的相關(guān)性,,因而被動物教學(xué)醫(yī)院和標(biāo)準(zhǔn)參照實(shí)驗(yàn)室采用,。但是,這個(gè)儀器的價(jià)格在US$150-200,000(約合人民幣120-160萬),,對大多數(shù)動物醫(yī)院和診所來說高不可攀,。
美國愛貝斯( Abaxis ) HMII分析儀已通過美國FDA認(rèn)證,并且2004年美國科羅拉多州立大學(xué)和加拿大安大略省獸醫(yī)學(xué)院將HMII和大型鐳射檢測儀( Bayer Advia 120 )作過對比研究,,所得出的血像在精確度及測試的穩(wěn)定性上二者不相伯仲,,表現(xiàn)驚人。
然而,,即使是最先進(jìn)的血細(xì)胞分析儀也會受到動物血樣特異性的影響。最常見的問題如下:
·貓科動物的抗溶紅細(xì)胞(lyse-resistant RBCs)
·貓科動物的巨大和/或凝集的血小板
·犬科動物的白細(xì)胞大小均一性(約為20-25%)
·未成熟/病理細(xì)胞分類的混淆
理解上述問題是很重要的,,可讓您理解血細(xì)胞分析儀的原理和限制,,從而幫助您驗(yàn)證和選購動物專用的血細(xì)胞分析儀。
如果你正在考慮買一臺血細(xì)胞分析儀,,請堅(jiān)持要求銷售商允許您和您的職員親自操作這臺儀器,。從您的診所角度來評估它的:
·操作簡便性
·得出結(jié)果所需的時(shí)間
·所需要的樣本量
·可檢測的動物種類
·維修需求
·數(shù)據(jù)庫容量和功能
然后,,您把儀器得出的測試結(jié)果和標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室或手工看顯微鏡片所得出的結(jié)果對照,來證實(shí)準(zhǔn)確和精確度,。并且請您用同一個(gè)樣本做多次檢測,,來確定結(jié)果的重復(fù)再現(xiàn)性(精確度)。
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