隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的發(fā)展,,及時(shí)診斷出血、血栓性疾病,觀察療效,,分析抗凝藥物劑量等顯得越來越迫切,,而傳統(tǒng)的手工方法和單一的凝固定性檢查已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床要求,全自動(dòng)血凝儀的出現(xiàn)和應(yīng)用,,使得止血和血栓項(xiàng)目檢查變得簡便,、準(zhǔn)確、可靠,、極大地滿足了臨床診療的需要,。
1.檢測的基本方法
目前血凝儀大多采用生物學(xué)方法,可分成三類:電流法,、粘度法,、光學(xué)法。?
1.1電流法:該法是利用血漿標(biāo)本纖維蛋白具有的導(dǎo)電性,,將電極插入標(biāo)本中,,利用兩電極之間的電流的通、斷來判斷纖維蛋白是否形成,,依此確定凝固終點(diǎn)。?
1.2 粘度法:又稱磁珠法,,儀器的檢測部分有獨(dú)立的線圈產(chǎn)生所需的電磁場,,檢測時(shí)在待測標(biāo)本中加入小磁珠,利用變化的磁場使小磁珠產(chǎn)生運(yùn)動(dòng),,隨著血漿的凝固,,血漿的粘稠度征集增加,小磁珠擺幅逐漸減少,,儀器內(nèi)的電磁傳感器,,測定小磁珠的不同震蕩幅度,計(jì)算出血漿的凝固時(shí)間,。?
1.3 光學(xué)法:該法是目前血凝儀使用最多的一種檢測方法,。當(dāng)血漿在樣品杯中逐漸凝固時(shí),纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白,,其理學(xué)性狀也隨著變化,;當(dāng)一束光通過樣品杯時(shí),其透射光和散光的強(qiáng)度也會(huì)隨之變化,。?
2.檢測的基本原理?
比濁法以血漿中的被檢測物質(zhì)作為抗原,,抗原與試劑中的抗體混合時(shí)會(huì)發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng),產(chǎn)生復(fù)合物顆粒,,依此來測定被檢測物質(zhì)含量,。其原理是:抗原量同抗體特異性結(jié)合反應(yīng)達(dá)到某一程度與所需的時(shí)間之間存在一定的數(shù)量關(guān)系,在檢測過程中,隨著待檢物質(zhì)與相應(yīng)抗體結(jié)合,,其復(fù)合物顆粒增多單色光通過時(shí),,透過的或反射的光強(qiáng)度就會(huì)發(fā)生一定的變化,儀器的電路部分自動(dòng)算出單位時(shí)間內(nèi)吸光度的變化量,,再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線推算出待檢物質(zhì)的含量,。?
使用光學(xué)法檢測時(shí),一般是將預(yù)溫好的血漿標(biāo)本和試劑快速混合,,在混合瞬間吸光度非常弱,,隨著樣品和試劑混合物中的纖維蛋白凝塊的形成,反應(yīng)杯內(nèi)標(biāo)本吸光度逐漸增強(qiáng),,當(dāng)標(biāo)本凝固完全后,,吸光度值就穩(wěn)定下來;儀器在血漿和試劑混合的瞬間,,也就是吸光度最弱時(shí),,設(shè)定吸光度值A(chǔ)=0%,在血漿和樣品凝固完全后,吸光度最強(qiáng)時(shí),,設(shè)定吸光度值A(chǔ)=100%,;在0%-100%吸光度變化之間,儀器檢測通道單位時(shí)間內(nèi)分別采集多個(gè)數(shù)據(jù),,這樣吸光度的變化值可做出一條曲線,,儀器根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目需要自動(dòng)選取曲線上的一個(gè)點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的時(shí)間為凝血時(shí)間;儀器內(nèi)的計(jì)算電路對(duì)做出的曲線求二次微分,,二次微分為零的點(diǎn),,就是凝固終點(diǎn);因?yàn)槟且粋€(gè)酶促的加速過程,,到凝固終點(diǎn)時(shí),,反應(yīng)速度和加速度都達(dá)到最大,此時(shí)凝固曲線的二次微分為零,。?
儀器在測定待測血漿樣品前,,必須首先定標(biāo),也是對(duì)已知濃度或活性的標(biāo)準(zhǔn)品的凝血時(shí)間來制定標(biāo)準(zhǔn)曲線,;在檢測待測樣品時(shí),,計(jì)算電路首先檢測出血漿的凝固時(shí)間,在根據(jù)凝固時(shí)間從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出濃度或活性,。
3.儀器的檢測項(xiàng)目和臨床應(yīng)用
儀器的檢測項(xiàng)目一般都有十幾種,,用戶可根據(jù)臨床需要和試劑情況選擇檢測項(xiàng)目。?
其中:凝血實(shí)驗(yàn)主要是針對(duì)人體內(nèi)抗酶系統(tǒng)和纖溶系統(tǒng)中的酶,、酶原和一些因子的測定,,常檢項(xiàng)目有:(1)TT-凝血酶時(shí)間,;(2)PT-凝血酶原時(shí)間;(3)APTT-部分凝血活酶時(shí)間,;(4)FIB-纖維蛋白,。除此,還可測定下列參數(shù):(1)凝血因子分析胞漿素,;(3)肝素抗-Xa,;(4)蛋白C及活性蛋白C;(5)狼瘡抗凝物,;(6)蛋白C和S抗凝物等等,。
當(dāng)病人發(fā)生DIC、原發(fā)性纖溶癥,、維生素K缺乏癥,、肝臟疾病或血液循環(huán)中有抗凝物質(zhì)時(shí),凝血酶原時(shí)間(PT)都會(huì)延長,;若PT縮短則常見于凝血因子V增多癥,、高凝狀態(tài)和血栓性疾病等。當(dāng)病人有肝臟疾病,、阻塞性黃疸,、新生兒出血癥、腸道滅菌綜合征,、吸收不良綜合征等某種疾病時(shí),,活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)會(huì)延長;APTT參數(shù)是反映血漿中凝血因子VIII,、LX、XI,、XII水平的實(shí)驗(yàn),,是外源性凝血系統(tǒng)的篩選實(shí)驗(yàn);當(dāng)血漿中這幾種因子某種減少時(shí),,APTT參數(shù)也延長,,可進(jìn)一步檢查凝血因子,若VIII因子缺乏可能是甲型血友病,、LX因子缺乏一般是乙型血友病,。而APTT減少,一般是血栓性病癥,,如心肌或肺梗死,、腦血管病變等或是促凝物質(zhì)進(jìn)入血液及凝血因子活性增高。當(dāng)纖維蛋白原濃度(FIB)大于4?5g/L時(shí):常見于糖尿病酸中毒,、尿毒癥,、急性腎炎,、休克、急性感染和惡性腫瘤及外科大手術(shù)等,。FIB參數(shù)小于1?7g/L時(shí),,多見于彌漫性血管內(nèi)凝血和原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎和肝硬化等,;FIB參數(shù)也用一起監(jiān)測防檢和溶栓治療,。總之,,在醫(yī)學(xué)各科對(duì)疾病的研究,、診斷和治療方面,凝血分析的各個(gè)參數(shù)均有其不同的重要意義,。
http://bbs.aibaoyl.com/
1.檢測的基本方法
目前血凝儀大多采用生物學(xué)方法,可分成三類:電流法,、粘度法,、光學(xué)法。?
1.1電流法:該法是利用血漿標(biāo)本纖維蛋白具有的導(dǎo)電性,,將電極插入標(biāo)本中,,利用兩電極之間的電流的通、斷來判斷纖維蛋白是否形成,,依此確定凝固終點(diǎn)。?
1.2 粘度法:又稱磁珠法,,儀器的檢測部分有獨(dú)立的線圈產(chǎn)生所需的電磁場,,檢測時(shí)在待測標(biāo)本中加入小磁珠,利用變化的磁場使小磁珠產(chǎn)生運(yùn)動(dòng),,隨著血漿的凝固,,血漿的粘稠度征集增加,小磁珠擺幅逐漸減少,,儀器內(nèi)的電磁傳感器,,測定小磁珠的不同震蕩幅度,計(jì)算出血漿的凝固時(shí)間,。?
1.3 光學(xué)法:該法是目前血凝儀使用最多的一種檢測方法,。當(dāng)血漿在樣品杯中逐漸凝固時(shí),纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白,,其理學(xué)性狀也隨著變化,;當(dāng)一束光通過樣品杯時(shí),其透射光和散光的強(qiáng)度也會(huì)隨之變化,。?
2.檢測的基本原理?
比濁法以血漿中的被檢測物質(zhì)作為抗原,,抗原與試劑中的抗體混合時(shí)會(huì)發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng),產(chǎn)生復(fù)合物顆粒,,依此來測定被檢測物質(zhì)含量,。其原理是:抗原量同抗體特異性結(jié)合反應(yīng)達(dá)到某一程度與所需的時(shí)間之間存在一定的數(shù)量關(guān)系,在檢測過程中,隨著待檢物質(zhì)與相應(yīng)抗體結(jié)合,,其復(fù)合物顆粒增多單色光通過時(shí),,透過的或反射的光強(qiáng)度就會(huì)發(fā)生一定的變化,儀器的電路部分自動(dòng)算出單位時(shí)間內(nèi)吸光度的變化量,,再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線推算出待檢物質(zhì)的含量,。?
使用光學(xué)法檢測時(shí),一般是將預(yù)溫好的血漿標(biāo)本和試劑快速混合,,在混合瞬間吸光度非常弱,,隨著樣品和試劑混合物中的纖維蛋白凝塊的形成,反應(yīng)杯內(nèi)標(biāo)本吸光度逐漸增強(qiáng),,當(dāng)標(biāo)本凝固完全后,,吸光度值就穩(wěn)定下來;儀器在血漿和試劑混合的瞬間,,也就是吸光度最弱時(shí),,設(shè)定吸光度值A(chǔ)=0%,在血漿和樣品凝固完全后,吸光度最強(qiáng)時(shí),,設(shè)定吸光度值A(chǔ)=100%,;在0%-100%吸光度變化之間,儀器檢測通道單位時(shí)間內(nèi)分別采集多個(gè)數(shù)據(jù),,這樣吸光度的變化值可做出一條曲線,,儀器根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目需要自動(dòng)選取曲線上的一個(gè)點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的時(shí)間為凝血時(shí)間;儀器內(nèi)的計(jì)算電路對(duì)做出的曲線求二次微分,,二次微分為零的點(diǎn),,就是凝固終點(diǎn);因?yàn)槟且粋€(gè)酶促的加速過程,,到凝固終點(diǎn)時(shí),,反應(yīng)速度和加速度都達(dá)到最大,此時(shí)凝固曲線的二次微分為零,。?
儀器在測定待測血漿樣品前,,必須首先定標(biāo),也是對(duì)已知濃度或活性的標(biāo)準(zhǔn)品的凝血時(shí)間來制定標(biāo)準(zhǔn)曲線,;在檢測待測樣品時(shí),,計(jì)算電路首先檢測出血漿的凝固時(shí)間,在根據(jù)凝固時(shí)間從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出濃度或活性,。
3.儀器的檢測項(xiàng)目和臨床應(yīng)用
儀器的檢測項(xiàng)目一般都有十幾種,,用戶可根據(jù)臨床需要和試劑情況選擇檢測項(xiàng)目。?
其中:凝血實(shí)驗(yàn)主要是針對(duì)人體內(nèi)抗酶系統(tǒng)和纖溶系統(tǒng)中的酶,、酶原和一些因子的測定,,常檢項(xiàng)目有:(1)TT-凝血酶時(shí)間,;(2)PT-凝血酶原時(shí)間;(3)APTT-部分凝血活酶時(shí)間,;(4)FIB-纖維蛋白,。除此,還可測定下列參數(shù):(1)凝血因子分析胞漿素,;(3)肝素抗-Xa,;(4)蛋白C及活性蛋白C;(5)狼瘡抗凝物,;(6)蛋白C和S抗凝物等等,。
當(dāng)病人發(fā)生DIC、原發(fā)性纖溶癥,、維生素K缺乏癥,、肝臟疾病或血液循環(huán)中有抗凝物質(zhì)時(shí),凝血酶原時(shí)間(PT)都會(huì)延長,;若PT縮短則常見于凝血因子V增多癥,、高凝狀態(tài)和血栓性疾病等。當(dāng)病人有肝臟疾病,、阻塞性黃疸,、新生兒出血癥、腸道滅菌綜合征,、吸收不良綜合征等某種疾病時(shí),,活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)會(huì)延長;APTT參數(shù)是反映血漿中凝血因子VIII,、LX、XI,、XII水平的實(shí)驗(yàn),,是外源性凝血系統(tǒng)的篩選實(shí)驗(yàn);當(dāng)血漿中這幾種因子某種減少時(shí),,APTT參數(shù)也延長,,可進(jìn)一步檢查凝血因子,若VIII因子缺乏可能是甲型血友病,、LX因子缺乏一般是乙型血友病,。而APTT減少,一般是血栓性病癥,,如心肌或肺梗死,、腦血管病變等或是促凝物質(zhì)進(jìn)入血液及凝血因子活性增高。當(dāng)纖維蛋白原濃度(FIB)大于4?5g/L時(shí):常見于糖尿病酸中毒,、尿毒癥,、急性腎炎,、休克、急性感染和惡性腫瘤及外科大手術(shù)等,。FIB參數(shù)小于1?7g/L時(shí),,多見于彌漫性血管內(nèi)凝血和原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎和肝硬化等,;FIB參數(shù)也用一起監(jiān)測防檢和溶栓治療,。總之,,在醫(yī)學(xué)各科對(duì)疾病的研究,、診斷和治療方面,凝血分析的各個(gè)參數(shù)均有其不同的重要意義,。
http://bbs.aibaoyl.com/