先用肉湯培養(yǎng)基復(fù)活,，此為菌種第一代,；從營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物中挑菌液劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板,，選擇典型菌落,，接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面,，此為菌種第二代；一個(gè)月后,，從斜面上挑菌劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板,，選擇典型菌落，接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面,，此為菌種第三代,；依次下去，直至第五代,，就可以不再接了,，可以買新的菌種了。

1.選擇復(fù)活用的培養(yǎng)基,可選用說(shuō)明書(shū)中推薦的培養(yǎng)基,根據(jù)菌株的分類進(jìn)行選擇,請(qǐng)說(shuō)明購(gòu)買菌株的類型或名稱,；

2.選擇菌株保存的方法：冷凍真空干燥保藏法（可保存10年以上,，需真空冷凍干燥機(jī)等設(shè)備）、超低溫保藏(可保存兩年左右,，但需有-80℃冰箱),、定期移植保藏法（可保存1-6月） ，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇,；

3.準(zhǔn)備需要的培養(yǎng)基,、保存管、甘油,、尖頭吸管（有時(shí)常規(guī)吸管太粗,，無(wú)法深入菌種管底部）、開(kāi)啟工具等,；

4.無(wú)菌開(kāi)啟菌種管,，將管內(nèi)干粉溶解轉(zhuǎn)入相關(guān)培養(yǎng)基，培養(yǎng)后選擇保存菌種的代數(shù),；

5.進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)（革蘭氏染色,、菌落形態(tài),、生化試驗(yàn)、血清試驗(yàn)或其他鑒定系統(tǒng)等）,，確認(rèn)后保存菌種,，注意整個(gè)過(guò)程的無(wú)菌操作。