先用肉湯培養(yǎng)基復(fù)活，此為菌種第一代,；從營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物中挑菌液劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板,，選擇典型菌落，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面,，此為菌種第二代,；一個月后，從斜面上挑菌劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板,，選擇典型菌落,，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，此為菌種第三代,；依次下去,，直至第五代，就可以不再接了,，可以買新的菌種了,。

1.選擇復(fù)活用的培養(yǎng)基,可選用說明書中推薦的培養(yǎng)基,根據(jù)菌株的分類進(jìn)行選擇,請說明購買菌株的類型或名稱；

2.選擇菌株保存的方法：冷凍真空干燥保藏法（可保存10年以上,，需真空冷凍干燥機(jī)等設(shè)備）,、超低溫保藏(可保存兩年左右，但需有-80℃冰箱),、定期移植保藏法（可保存1-6月） ,，請根據(jù)實際情況進(jìn)行選擇；

3.準(zhǔn)備需要的培養(yǎng)基,、保存管,、甘油、尖頭吸管（有時常規(guī)吸管太粗,，無法深入菌種管底部）,、開啟工具等；

4.無菌開啟菌種管,，將管內(nèi)干粉溶解轉(zhuǎn)入相關(guān)培養(yǎng)基,，培養(yǎng)后選擇保存菌種的代數(shù)；

5.進(jìn)行驗證實驗（革蘭氏染色,、菌落形態(tài),、生化試驗、血清試驗或其他鑒定系統(tǒng)等），確認(rèn)后保存菌種,，注意整個過程的無菌操作,。