1放置在冰箱中的培養(yǎng)基顏色會(huì)發(fā)生變化,,為什么,?
答:培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中,,培養(yǎng)基內(nèi)CO2 會(huì)逐漸溢出,,造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性,。而培養(yǎng)基中酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿后再用于細(xì)胞培養(yǎng)將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡,。培養(yǎng)基偏堿時(shí),,可以通入無(wú)菌過(guò)濾的CO2,以調(diào)整pH值,。
2什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅,?
答:酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,,堿性時(shí)為紫色,。酚紅本身對(duì)生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生影響,可以通過(guò)純化技術(shù)去除,但酚紅在無(wú)血清培養(yǎng)基可能帶來(lái)胞內(nèi)鈉/鉀失衡,,影響細(xì)胞生長(zhǎng),。但在有血清培養(yǎng)中,這種作用能被血清中和或減輕,。 酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,,很多國(guó)外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中都使用無(wú)酚紅培養(yǎng)基。
3低血清培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)是什么,?
答:平衡鹽一般是由無(wú)機(jī)鹽及葡萄糖組成的,。平衡鹽有Hanks′系統(tǒng)、Earle′s系統(tǒng),、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統(tǒng)等,。199傳統(tǒng)培養(yǎng)基、MEM傳統(tǒng)培養(yǎng)基均有Hanks′系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle′s系統(tǒng)的培養(yǎng)基,。但是有些培養(yǎng)基均不是以上常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),,例如RPMI 1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基,。MEM低血清培養(yǎng)基的平衡鹽系統(tǒng)也不是常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),該平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力強(qiáng)于常規(guī)平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力,。
4低血清培養(yǎng)基能用肉眼判斷其pH值嗎,?
答:低血清培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過(guò)肉眼觀察或通過(guò)經(jīng)驗(yàn)來(lái)判定pH值,,建議使用pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定,。
5CO2 培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?
答:定期(至少每?jī)芍芤淮? 以無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子水更換之,。