1,、HEPES在細胞培養(yǎng)過程中起什么作用,?
答:HEPES溶液:是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化,。在開放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,,CO2氣體迅速逸出,,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持pH7.0左右,。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES,。
2、什么是無血清培養(yǎng)基,?與普通培養(yǎng)基有什么區(qū)別,?
答:無血清培養(yǎng)基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分,?;境煞职ɑA(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。添加組分可能包括纖連蛋白,、層粘連蛋白等貼壁因子,、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白,、硒等,。
3、細胞體內(nèi)外培養(yǎng)的差別是什么,?
答:細胞離體后,,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細胞間的相互影響,生活在缺乏動態(tài)平衡相對穩(wěn)定的環(huán)境中,,日久天長,,易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡,;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,,變成可無限生長的連續(xù)細胞系或惡性細胞系,。因此,,培養(yǎng)中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,,也有一些不同于體內(nèi)細胞的性狀,。實際上細胞一旦被置于體外培養(yǎng)后,這種差異就開始發(fā)生了,。
4,、二倍體細胞有什么特點?
答:二倍體細胞的染色體組型是2n核型,;貼壁依賴接觸抑制,;一般可傳代培養(yǎng)50代;無致瘤性,。如W1-38:正常胚肺組織人二倍體細胞系,。MRC-5:從正常男性肺組織中獲得的人二倍體細胞系。