細胞計數法是用來計數細胞懸液中細胞數量的一種方法。一般利用計數板（血球計數板）進行,。即可用于分離（散）細胞培養(yǎng)接種前計數所制備的細胞懸液中的細胞數量,，也可用于對培養(yǎng)物的細胞數量進行計數,。不論計數的對象如何,，均須制備分散的細胞懸液。
一,、步驟
1,、制備細胞懸液：對于懸液培養(yǎng)的細胞，可直接進行下面的步驟2（計數與計算過程）,。如果計數對象為貼壁生長的細胞,，首先需將培養(yǎng)物按如下步驟制備成細胞懸液。
1）,、終止培養(yǎng),，將培養(yǎng)液吸出，用PBS洗培養(yǎng)物一次,。
2）,、給培養(yǎng)瓶內加入1ml 0.25％胰蛋白酶溶液，于37℃消化3～5min ,。期間不斷在鏡下觀察,。當細胞變圓接近脫壁時，棄消化液,。
3）,、加入一定量的培養(yǎng)液（如果這些培養(yǎng)細胞不再有用，可加PBS）,，用吸管吹打,，使細胞脫壁而制成細胞懸液。
2,、計數與計算過程
1）,、在細胞計數板中央放置計數專用的蓋玻片。
2）、用玻璃虹吸管吸取細胞,，讓虹吸管在蓋玻片上或下側的計數板凹蹧處流出懸液,，至蓋玻片被液體充滿為止。
3）,、置顯微鏡下計數四角大方格內的細胞總數,。對于壓線的細胞只計數在上線和左線者，對于細胞團按單個細胞計數,。
4）,、按下式計數細胞懸液的密度：細胞密度＝（4個大格細胞總數/4）×104個/ml 。
二,、注意事項：
1）、務必使分散成單個細胞,，取樣計數前,，充分混勻細胞懸液。
2）,、顯微鏡下計數時,，遇到2個以上細胞組成的細胞團，應按單個細胞計算,。如果細胞團>10％,，說明細胞分散不充分。
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