使用16×25規(guī)格的計數(shù)板時,，只計板上四個角上的4個中格（即100個小格）,，如果使用25×16規(guī)格的計數(shù)板時,，除計四個角上的4個中格外,，還需要計中央一個中格的數(shù)目（即80個小格）。每個樣品重復觀察計數(shù)不少于2次,，然后取其平均值,。
計算
（1）16×25的計數(shù)板
孢子數(shù)（個/g）=(N/100) ×400×10000×(V/G)=4×104×(NV/G)…………（1）
式中 N——100小格內(nèi)孢子總數(shù) （個）
V——孢子稀釋液體積 （ml）
G——樣品重量 （g）
（2） 25×16的計數(shù)板
孢子數(shù)（個/g）=(N/80) ×400×10000×(V/G)=5×104×(NV/G) …………………………（2）
式中 N——80小格內(nèi)孢子總數(shù) （個）
V——孢子稀釋液體積 （ml）
G——樣品重量 （g）
1．將血細胞計數(shù)實驗結(jié)果填入下表。
計 算
次 數(shù) 4個大方格白細胞數(shù) 5個大方格紅細胞數(shù)
1 2 3 4 總數(shù) 1 2 3 4 5 總數(shù)
第1次
第2次
兩次平
均總數(shù)
血細胞
計 數(shù)
4．充液
2類血細胞計數(shù)分2次充液,，方法如下,。
（1）取干凈的計數(shù)板平放于實驗桌上，將蓋玻片置入計數(shù)板正中央,?！镉嫈?shù)板和蓋玻片在使用前必須用軟綢或擦鏡紙擦凈，并在低倍鏡下檢查計數(shù)室是否干凈,，其刻度是否清晰,。用小滴管吸取稀釋血液，并將管尖輕輕斜置于蓋玻片邊緣,，讓稀釋血液緩慢流出,，借毛細管現(xiàn)象而自動流入計數(shù)室內(nèi)。一般應一次充液使計數(shù)室內(nèi)充滿稀釋血液,，若經(jīng)幾次充液，易形成氣泡,，應洗凈計數(shù)板和蓋玻片,，干燥后重新充液。
（2）稀釋的血液充入計數(shù)室后,，靜置2～3min,，待細胞不再浮動后，于低倍鏡下計數(shù),。
5．計數(shù)
為防止重復計數(shù)和漏數(shù),，計數(shù)時應遵循一定的順序進行，即“從左到右,，自上而下”,；對正好壓在格線上的血細胞，依照“數(shù)上不數(shù)下,，數(shù)左不數(shù)右”的原則進行計數(shù)（圖3-2）,。
如計數(shù)白細胞時發(fā)現(xiàn)各大方格的白細胞數(shù)相差8個以上，計數(shù)紅細胞時發(fā)現(xiàn)各中方格的紅細胞數(shù)最多與最少相差20個以上時,，則表示血細胞分布不均勻,，必須將稀釋的血液搖勻后再重新充入計數(shù)室計數(shù)。
6．計算
（1）白細胞數(shù) 將四角的4個大方格內(nèi)數(shù)得的白細胞總數(shù)乘以50,，即得每立方毫米血液內(nèi)的白細胞總數(shù),，也可將對角兩個大方格內(nèi)數(shù)得的白細胞總數(shù)乘以100,。因為：
稀釋液0.38mL加入血液20mm3（1mL＝1000mm3，
故20mm3＝0.02mL,）,，使血液稀釋20倍,，換算成未稀釋血時應乘以20。
在計數(shù)時僅統(tǒng)計四角的4個大方格內(nèi)的白細胞,，其容積為lmm×1mm×0.1mm×4＝0.4mm3,，換算成每立方毫米時應乘以2.5。這樣,，把四角4個大方格內(nèi)數(shù)得的白細胞總數(shù)乘以50（即20×2.5＝50）,，即得每立方毫米血內(nèi)的白細胞總數(shù)。
（2）紅細胞數(shù) 將中央大方格中的四角和中央的中方格共5個中方格內(nèi)數(shù)得的紅細胞總數(shù)乘以10 000,，即得每立方毫米血內(nèi)紅細胞的總數(shù),。因為：
稀釋液3.98mL，加入血20mm3（即0.02mL）,，使血液稀釋200倍,，換算成未稀釋血時應乘以200。
在計數(shù)時僅統(tǒng)計0.02 mm3內(nèi)的紅細胞（1個中方格的容積為0.2mm×0.2mm×0.1mm＝0.004mm3,，5個中方格的容積為0.004mm3×5＝0.02mm3）,，換算成每立方毫米時應乘以50。這樣把5個中方格內(nèi)數(shù)得的紅細胞總數(shù)乘以10 000（即200×50＝10000）,，即得每立方毫米血內(nèi)的紅細胞總數(shù),。
（3）按目前臨床上血細胞計數(shù)采用的通用單位，將以上所獲每毫升血液中所含各血細胞數(shù)量換算為各血細胞在每升血液中的數(shù)量,。
7．清洗血細胞計數(shù)板
蓋玻片及計數(shù)板用過之后,，必須立即用水沖洗，但不可用硬物刷洗,。計數(shù)板晾干或吹風機吹干后,，應鏡檢計數(shù)室是否干凈，如不干凈必須重復洗至干凈為止,。
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