藍(lán)細(xì)菌脂肪烴生物合成途徑及脂肪醛脫甲酰加氧酶(ADO)電子轉(zhuǎn)移簡圖
由于脂肪烴生物燃料具有高能量密度、低吸濕性和低揮發(fā)性,,且與現(xiàn)有發(fā)動機和運輸設(shè)施相兼容等優(yōu)點,,已經(jīng)成為傳統(tǒng)石化液體燃料的最佳替代品之一?;谒{(lán)細(xì)菌作為光合能源微生物體系的優(yōu)勢,,通過藍(lán)細(xì)菌高效定向生物合成脂肪烴,實現(xiàn)單一生物體內(nèi)直接利用太陽能和二氧化碳高效制備新型優(yōu)質(zhì)生物液體燃料具有重要意義,。
近日,,中國科學(xué)院青島生物能源與過程研究所生物代謝工程團(tuán)隊在負(fù)責(zé)人、中科院“百人計劃”入選者呂雪峰研究員帶領(lǐng)下,,從基因—蛋白—細(xì)胞等多尺度對藍(lán)細(xì)菌脂肪烴生物合成開展系統(tǒng)研究,,取得一系列新進(jìn)展,相關(guān)成果發(fā)表在Applied Energy,、Biotechnology for Biofuels,、Applied Microbiology and Biotechnology等期刊。
在基因尺度,,通過對19株野生藍(lán)細(xì)菌基因序列特征分析及構(gòu)建菌株16SrDNA,、脂酰ACP還原酶和脂肪醛脫甲酰加氧酶進(jìn)化樹,初步解析了產(chǎn)烴關(guān)鍵基因的分子進(jìn)化關(guān)系,,并發(fā)現(xiàn)藍(lán)細(xì)菌形態(tài)特征與其脂肪烴組成之間存在一定關(guān)聯(lián)性,,支鏈脂肪烴主要存在于絲狀藍(lán)細(xì)菌中,。(Applied Energy,2013,113,383-393)
在蛋白尺度,克隆,、表達(dá),、表征了來自聚球藻PCC7942的脂肪醛脫甲酰加氧酶及還原系統(tǒng),和異源(來自菠菜)及化學(xué)還原系統(tǒng)相比,,同源還原系統(tǒng)更能促進(jìn)脂肪醛脫甲酰加氧酶的活性,,比化學(xué)還原系統(tǒng)的kcat提高了近2.7倍。(Biotechnology for Biofuels, 2013, 6:86)
在細(xì)胞尺度,,優(yōu)化構(gòu)建了修飾脂肪烴生物合成途徑脂酰ACP還原酶和脂肪醛脫甲酰加氧酶等關(guān)鍵基因元件的多株基因工程藍(lán)細(xì)菌,,脂肪烴產(chǎn)量最高達(dá)到野生型的8倍。(Biotechnology for Biofuels, 2013, 6:69)
同時,,在藍(lán)細(xì)菌基因工程方法方面,,建立了基于FRT/FLP重組系統(tǒng)的藍(lán)細(xì)菌基因工程無抗篩選新方法,實現(xiàn)了藍(lán)細(xì)菌中抗性標(biāo)簽的循環(huán)利用,,為多基因,、多位點至基因組范圍的藍(lán)細(xì)菌遺傳改造,進(jìn)一步顯著提高藍(lán)細(xì)菌脂肪烴生物合成效率奠定了技術(shù)基礎(chǔ),。(Applied Microbiology and Biotechnology, 2013, doi:10.1007/s00253-013-4837-6)
上述工作得到了科技部“973”計劃,、國家自然科學(xué)基金委、中國科學(xué)院,、波音公司等項目支持,。(生物谷 Bioon.com)