Bio-Rad公司近日推出了一款“高級(jí)”的cDNA合成試劑盒，適用于定量PCR前的cDNA合成。此款名為iScript Advanced cDNA synthesis kit的試劑盒能幫助研究人員生成更多的定量PCR數(shù)據(jù)，用于基因表達(dá)分析,。
一般的逆轉(zhuǎn)錄試劑盒只能對(duì)1 µg總RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，而iScript Advanced cDNA synthesis kit最多能對(duì)7.5 µg總RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，大大超越了同類產(chǎn)品,。這種在單個(gè)反應(yīng)中逆轉(zhuǎn)錄更多RNA的能力有助于改善重復(fù)性，降低每個(gè)qPCR數(shù)據(jù)點(diǎn)的成本,，并增加某些目的基因的靈敏度,。
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起始RNA增加了,，獲得的cDNA自然也就更多,。這樣，單個(gè)RT反應(yīng)的產(chǎn)物就足夠所有目的基因的qPCR分析,，包括看家基因,，減少了反應(yīng)間的差異，提高了重復(fù)性,。逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)生成的20 µl cDNA可稀釋100倍,，以96孔板的qPCR反應(yīng)來(lái)計(jì)，每孔加入2 µl cDNA,，那么逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)生成的cDNA最多能產(chǎn)生1000個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn),，從而降低了每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)的成本。
iScript Advanced cDNA synthesis kit在使用起來(lái)也非常簡(jiǎn)便,。它只有兩支管,，包括iScript Advanced預(yù)混液和iScript Advanced逆轉(zhuǎn)錄酶。預(yù)混液中包含了RNase抑制劑,，在反應(yīng)體系建立和逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中能防止RNA降解,。此外，Oligo(dT)和隨機(jī)引物的最優(yōu)組合帶來(lái)出色的RNA覆蓋,。此款試劑盒也非?？焖伲恍?5分鐘即可完成逆轉(zhuǎn)錄,。合成的cDNA可用于各種實(shí)時(shí)定量PCR（SYBR Green,、EvaGreen或探針）及傳統(tǒng)的PCR。
iScript Advanced cDNA synthesis kit屬于iScript逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品家族中的一員,，此家族還包括：
• iScript cDNA synthesis kit：經(jīng)典的兩管式逆轉(zhuǎn)錄試劑盒,，能對(duì)1 pg至1 µg的總RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，40分鐘可完成反應(yīng),。
• iScript reverse transcription supermix：一管式的逆轉(zhuǎn)錄預(yù)混液,，能對(duì)100 fg至1 µg的總RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，適合高通量應(yīng)用,。
• iScript Select cDNA synthesis kit：您可以自由選擇逆轉(zhuǎn)錄引物,，包含單獨(dú)的Oligo(dT)、隨機(jī)引物和GSP引物增強(qiáng)液,，能對(duì)1 pg至1 µg的總RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,。
此外，Bio-Rad也提供了一步法的RT-qPCR試劑盒可供選擇,。若您想了解iScript系列逆轉(zhuǎn)錄試劑盒的更多信息
