高壓滅菌的原理是:在密閉的蒸鍋內(nèi),,其中的蒸汽不能外溢,,壓力不斷上升,,使水的沸點(diǎn)不斷提高,從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加,。在0.1MPa的壓力下,,鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下,,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢,。
高壓滅菌的原理是:在密閉的蒸鍋內(nèi),其中的蒸汽不能外溢,,壓力不斷上升,,使水的沸點(diǎn)不斷提高,從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加,。在0.1MPa的壓力下,,鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下,,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢,。
注意:完全排除鍋內(nèi)空氣,使鍋內(nèi)全部是水蒸氣,,滅菌才能徹底,。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法,但目的都是要排凈空氣,,使鍋內(nèi)均勻升溫,,保證滅菌徹底。常用方法是:關(guān)閉放氣閥,,通電后,,待壓力上升到0.05MPa時(shí),打開放氣閥,,放出空氣,,待壓力表指針歸零后,再關(guān)閉放氣閥,。關(guān)閥再通電后,,壓力表上升達(dá)到0.1MPa時(shí),開始計(jì)時(shí),維持壓力0.1~0.15MPa 20分鐘,。
到達(dá)保壓時(shí)間后,,即可切斷電源,在壓力降到0.5MPa,,可緩慢放出蒸氣,,應(yīng)注意不要使壓力降低太快,以致引起激烈的減壓沸騰,,使容器中的液體四溢,。當(dāng)壓力降到零后,才能開蓋,,取出培養(yǎng)基,,擺在平臺(tái)上,以待冷凝,。不可久不放氣,,引起培養(yǎng)基成分變化,以至培養(yǎng)基無法擺斜面 ,。一旦放置過久,,由于鍋爐內(nèi)有負(fù)壓,蓋子打不開,,只要將放氣閥打開,,大氣壓入,內(nèi)外壓力平衡,,蓋子便易打開了,。
對(duì)高壓滅菌后不變質(zhì)的物品,如無菌水,、栽培介質(zhì),、接種用具,可以延長滅菌時(shí)間或提高壓力,。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時(shí)間,,既要保壓徹底,又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低,,不能隨意延長時(shí)間,。