高壓滅菌的原理是:在密閉的蒸鍋內(nèi),其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,,使水的沸點(diǎn)不斷提高,,從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下,,鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃,。在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢,。
高壓滅菌的原理是:在密閉的蒸鍋內(nèi),,其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,,使水的沸點(diǎn)不斷提高,,從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下,,鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃,。在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢,。
注意:完全排除鍋內(nèi)空氣,,使鍋內(nèi)全部是水蒸氣,滅菌才能徹底,。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法,,但目的都是要排凈空氣,使鍋內(nèi)均勻升溫,,保證滅菌徹底,。常用方法是:關(guān)閉放氣閥,通電后,,待壓力上升到0.05MPa時(shí),,打開(kāi)放氣閥,放出空氣,,待壓力表指針歸零后,,再關(guān)閉放氣閥。關(guān)閥再通電后,,壓力表上升達(dá)到0.1MPa時(shí),開(kāi)始計(jì)時(shí),,維持壓力0.1~0.15MPa 20分鐘。
到達(dá)保壓時(shí)間后,,即可切斷電源,,在壓力降到0.5MPa,可緩慢放出蒸氣,,應(yīng)注意不要使壓力降低太快,,以致引起激烈的減壓沸騰,使容器中的液體四溢。當(dāng)壓力降到零后,,才能開(kāi)蓋,,取出培養(yǎng)基,擺在平臺(tái)上,,以待冷凝,。不可久不放氣,引起培養(yǎng)基成分變化,,以至培養(yǎng)基無(wú)法擺斜面 ,。一旦放置過(guò)久,由于鍋爐內(nèi)有負(fù)壓,,蓋子打不開(kāi),,只要將放氣閥打開(kāi),大氣壓入,,內(nèi)外壓力平衡,蓋子便易打開(kāi)了,。
對(duì)高壓滅菌后不變質(zhì)的物品,,如無(wú)菌水、栽培介質(zhì),、接種用具,,可以延長(zhǎng)滅菌時(shí)間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時(shí)間,,既要保壓徹底,,又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低,不能隨意延長(zhǎng)時(shí)間,。