1、加水：先將排水閥關閉,，調整總閥至“全排”,。然后，開啟進水閥,，放蒸餾水至蒸汽發(fā)生器內,，待水進至距水表頂端大約 1～2cm 處時,，關閉進水閥,，并將總閥調至“關閉”。
2,、裝鍋：將待滅菌物品裝入鍋內,，注意不要塞得過緊過滿，盛有培養(yǎng)基的三角瓶和試管應立放或適度傾斜．以免滅菌過程中培養(yǎng)基污染棉塞,。
3,、關門：按順時針方向轉動緊鎖手柄至紅箭頭處，使撐擋進入門圈內,。然后旋動八角轉盤,，使門和墊圈密合，以滅菌時不漏氣為度,，不宜太緊,，以免損壞墊圈。
4,、通電加溫：待電源控制開關的旋鈕旋至“開”處,，電源指示燈亮，表示已通電,，然后再按滅菌物品所需滅菌汽壓將旋切旋至 0.07MPa,、 0.1mPa 或 0.14MPs 處。此時電熱指示燈亮,，表示已通電加熱,。
5、保溫保壓：當蒸汽套層內的蒸汽隨加熱達到自動控制壓力時，電熱指示燈會白動熄滅,，表示停止加熱,。隨著熱力散發(fā)壓力降低，電熱指示燈再亮,，表示繼續(xù)加熱,，這表明壓力控制器工作正常。當套層內的蒸汽加熱到所選擇的控制壓力時,，即可將套層內的蒸汽導入消毒室進行滅菌,。此時應先將汽液分離器前的冷凝閥開放少許，然后將總閥調至“消毒”,，套層內的蒸汽即通過總閥進入消毒室進行消毒,，冷凝水則通過汽液分離器自動排出。這時蒸汽套層內蒸汽壓力迅速下降,，而消毒室內的蒸汽壓力逐漸上升,，消毒室內的溫度表也隨著物品被蒸汽加熱而上升。當表的溫度升到所需消毒溫度 ( 一般為 121 ℃ ) 時,，開始計算滅菌時間,，維持溫度至滅菌完畢。
6,、出鍋：滅菌完畢后,，立即切斷電源，按滅菌物品性質和要求,，決定消毒室內的蒸汽是自然冷卻還是采取“慢排”或“快排”,，例如，器械,、器皿,、固體曲料、土壤,、草炭等不致因壓力驟然下降而受影響的物品,，可直接將總閥調至“慢排”和“快排”，使消毒室內蒸汽迅速排出,。當消毒室內壓力下降至“0” 時,，方可緩慢轉動鍋門轉盤并撥動緊鎖手柄將門開啟 5～10 cm 。 20～30min 后將滅菌物品取出,，此時滅菌物品即較干燥,。溶液及培養(yǎng)基等物品滅菌完畢時，只能將總閥調至“慢排”,，使消毒室內蒸汽慢慢排出,，以免突然降低壓力導致培養(yǎng)基劇烈沸騰。也可在滅菌完畢后，關閉總閥,，讓滅菌物品自然冷卻,。消毒寶壓力表降至“0” 時、再將總閥調至“慢排”數(shù)分鐘取出滅菌物品,。
7,、連續(xù)操作：如滅菌物品較多需連續(xù)操作時，應先檢查水位,。有足夠水量時,，可連續(xù)使用。如需加水,、應把總閥調至“全排”,，打開進水閥加水后繼續(xù)操作。
8,、保養(yǎng)：每次滅菌完畢后,，關閉電源，停止加熱,，隨后將總閥調至“全排”,，排出套層內的蒸汽。開啟鉑門少許,，散發(fā)剩余蒸汽,，使消毒室內壁經常保持干燥，同時排除蒸汽發(fā)生器內的余水,。
