免疫組化染色步驟
1. 石蠟切片脫蠟和水化后,，用PBS(pH7.4)沖洗三次,，每次3分鐘（3x3`）。
2. 根據(jù)每一種抗體的要求,，對(duì)組織抗原進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù)。
3. 如果有必要,，每張切片加1滴（試劑A）室溫下孵育10分鐘，以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性,。
PBS沖洗3x3`,。
4. 除去PBS液,，每張切片加1滴或50μl的第一抗體(用戶(hù)自選),，室溫下孵育60分鐘或4℃
過(guò)夜,，建議參見(jiàn)每種抗體的說(shuō)明書(shū),。
5. PBS沖洗3x5`,。除去PBS液,，每張切片加1滴或50μl酶二抗聚合物(試劑B),，室溫下孵
育40分鐘或37度孵育30分鐘或4度過(guò)夜,。PBS沖洗3x3`,。
6. 除去PBS液,，每張切片加1滴或50μl新鮮配制的DAB或AEC溶液（詳見(jiàn)DAB或AEC使用
說(shuō)明書(shū)），顯微鏡下觀察3-5分鐘（DAB）或10分鐘（AEC）,。
7. 自來(lái)水沖洗,，蘇木素復(fù)染,，若有必要,，可用0.1%HCl分化,，自來(lái)水沖洗,，PBS返藍(lán)。
8. 如果用DAB顯色，則切片經(jīng)梯度酒精脫水干燥,，(二甲苯透明),，中性樹(shù)膠封固；如果
用AEC顯色,，則切片不能酒精脫水,，而直接用水性封片劑,。封片,。
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