本報(bào)訊  （記者孫國根）抗病毒“神藥”達(dá)菲一直是H7N9病毒的“克星”,，然而復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任袁正宏研究員領(lǐng)銜的研究團(tuán)隊(duì)證實(shí)：個(gè)別患者在達(dá)菲抗病毒治療19天后,，仍在其咽拭子標(biāo)本中檢測到H7N9病毒核酸，表明該病毒已出現(xiàn)基因突變和耐藥趨勢,。5月29日,，該研究論文在線發(fā)表在國際頂尖醫(yī)學(xué)雜志《柳葉刀》上。

　　在上海市防控H7N9疫情中,，該研究團(tuán)隊(duì)承擔(dān)著檢測收治患者標(biāo)本中H7N9病毒核酸載量的任務(wù),。該團(tuán)隊(duì)收集了病人治療過程中多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的咽拭子、血液,、尿液和糞便標(biāo)本,，使用自行設(shè)計(jì)的熒光定量RT-PCR方法對上述標(biāo)本中的H7N9流感病毒核酸載量進(jìn)行檢測，并對其中14位患者進(jìn)行了病毒載量與病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性分析,。結(jié)果發(fā)現(xiàn),，病癥相對較輕的患者經(jīng)達(dá)菲治療后，咽拭子的病毒載量顯著下降并較快轉(zhuǎn)陰,；而重癥患者,，特別是在后期需要依靠人工肺治療的患者，其咽拭子的病毒核酸載量在達(dá)菲治療過程中呈持續(xù)陽性,，甚至出現(xiàn)載量進(jìn)一步升高的現(xiàn)象,，有個(gè)別患者在達(dá)菲抗病毒治療19天后仍在其咽拭子標(biāo)本中檢測到了H7N9病毒核酸。

　　為解釋上述臨床治療中出現(xiàn)的“不尋?！爆F(xiàn)象,，袁正宏研究團(tuán)隊(duì)對患者標(biāo)本中H7N9禽流感病毒的兩個(gè)最重要蛋白HA和NA進(jìn)行基因序列擴(kuò)增研究和基因多態(tài)性分析， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩例重癥病例在抗病毒治療過程中其體內(nèi)H7N9毒株的神經(jīng)氨酸酶（NA）“292位氨基酸”從R（精氨酸）突變?yōu)镵（賴氨酸）,。也就是說,，在治療早期，292位點(diǎn)是R,，而治療后期這一位點(diǎn)卻呈現(xiàn)為K,。

　　該實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用Q-PCR單核酸多態(tài)性分析法進(jìn)行分析，結(jié)果有了更為重大的發(fā)現(xiàn)，即病人標(biāo)本中“292R毒株”竟然出現(xiàn)了逐漸被“292K毒株”取代的過程,。該結(jié)果強(qiáng)烈提示：這一突變毒株的出現(xiàn)可能與達(dá)菲治療效果不佳有關(guān),。該團(tuán)隊(duì)聯(lián)想到“NA R292K”的突變曾出現(xiàn)在季節(jié)性H3N2流感病毒上，以后研究證明該病毒對達(dá)菲耐藥,，更為“巧合”的是,，在上海地區(qū)最早出現(xiàn)的H7N9病毒中也發(fā)現(xiàn)存在這一突變，但當(dāng)時(shí)一直不清楚其臨床意義,。

　　專家指出，本研究的重大意義在于首次將“NA 292位”氨基酸的“R/K突變”與臨床達(dá)菲療效不佳和不良預(yù)后聯(lián)系起來,，并表明耐藥的基因突變可以在臨床抗病毒治療過程中被誘導(dǎo)產(chǎn)生,，即藥物“壓力”會促使患者體內(nèi)病毒產(chǎn)生變異突變，從而導(dǎo)致H7N9禽流感病毒呈現(xiàn)耐藥趨勢,。

　　上海市H7N9禽流感防治專家組組長,、微生物學(xué)專家聞玉梅院士認(rèn)為，該研究結(jié)果說明,，達(dá)菲治療依然對絕大部分患者有效,，一旦確診應(yīng)盡早治療，同時(shí)提示在達(dá)菲治療前和治療過程中必須要對病毒載量和耐藥“基因位點(diǎn)”進(jìn)行密切監(jiān)測,，及時(shí)調(diào)整治療方案,，以提高救治成功率。聞玉梅說,，加快新型抗病毒藥物研發(fā)已經(jīng)變得十分重要,。