血細胞分析儀是醫(yī)院進行血常規(guī)檢查的必備機器，不僅在世界各地,，而且在我國各級醫(yī)院都得到了普及應(yīng)用,。它不但提高了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，還提供了許多實驗指標(biāo),，對疾病的診斷和鑒別診斷起了重要的作用,。本文就簡單地談?wù)勱P(guān)于血細胞分析儀的幾個問題。
一．發(fā)展簡史
1947年美國科學(xué)家?guī)鞝柼?W.H.Coulter)發(fā)明了用電阻法計數(shù)粒子的專利技術(shù),。1956年他又將這一技術(shù)應(yīng)用于血細胞計數(shù)獲得成功,，其原理是根據(jù)血細胞非傳導(dǎo)的性質(zhì)，以電解質(zhì)溶液中懸浮血細胞在通過計數(shù)小孔時引起的電阻變化進行檢測為基礎(chǔ),，進行血細胞計數(shù)和體積測定,，這種方法稱為電阻法或庫爾特原理。1962年,，我國第一臺血細胞計數(shù)儀在上海研制成功,。到了60年代未血細胞分析儀除可進行血細胞計數(shù)外，還可以同時測定HGB血紅蛋白,。70年代,，血小板計數(shù)儀問世。80年代,，開發(fā)了白細胞分類(3分類及5分類),。90年代，開發(fā)出了可對網(wǎng)狀紅細胞進行計數(shù)的血細胞分析儀,，同時5分類及幼稚細胞檢測更成熟,，并發(fā)展成為血細胞分析流水線,。
二．如何選購血細胞分析儀
當(dāng)前，在我國境內(nèi)銷售的的血細胞分析儀品牌很多,，給醫(yī)院的選購造成了一定的麻煩,。如日本SYSMEX公司(東亞醫(yī)用電子株式會社)的血細胞分析儀系列、美國庫爾特公司(現(xiàn)已被貝克曼收購)的血細胞分析儀系列,、日本光電公司的血細胞分析儀系列,、美國丹能公司以及瑞典博爾醫(yī)療公司的血細胞分析儀系列，還有國產(chǎn)的血細胞分析儀系列,。因此建議醫(yī)院購買時從以下幾個角度考慮：
1.實用性,。醫(yī)院應(yīng)該根據(jù)自身的能力和標(biāo)本量來決定購買何種檔次的機器，不要盲目攀比,，爭相購買高檔機器,，從而造成儀器購置的浪費。
2.儀器性能,。這是最關(guān)鍵的一個因素,。不能完全相信廠家的宣傳，要多聽取專家意見和到友鄰單位了解,。
3.價格比,。衡量同檔次機器的價格。
4.售后服務(wù),。俗話說：救人如救火,。對機器也是一樣，機器損壞待修時間過長會造成病人對醫(yī)院的信譽度下降,，久而久之就會造成病人的流失,。所以，機器的售后服務(wù)也是一個必須考慮的因素,。
5.輔助設(shè)備,、試劑、消耗品和零配件價格,。
三．如何驗收血細胞分析儀
1.驗收前準(zhǔn)備工作：仔細閱讀說明書；按說明書要求準(zhǔn)備儀器的工作環(huán)境和相關(guān)的外部設(shè)備,；成立驗收小組,；擬定驗收計劃。
2.開箱：必要時請商檢局派人參加,；開箱后按照裝箱單清點物品是否和裝箱單一致,。
3.安裝：應(yīng)該對安裝過程進行詳細的記錄。
4.驗收儀器的技術(shù)性能指標(biāo)
(1)測定儀器試劑的本底,；
(2)檢測儀器的精密度：用高,、中,、低值新鮮血標(biāo)本各測10次，計算X－S,、CV值,，取20～30個標(biāo)本隨機排列，各測3次,，求出總重復(fù)性CV%,，它代表批內(nèi)精度、儀器穩(wěn)定性,、互染等因素的總和,；
(3)互染率：取高、低兩個濃度全血(高,、低值相差4～5倍),，先測定高濃度3次，接著測低濃度3次,，再測高濃度3次,，計算高對低、低對高的互染率,；
(4)線性：取全血標(biāo)本,，用鹽水稀釋相當(dāng)于全血的90%、80%,、70%……,，測得RBC、WBC,、HGB結(jié)果做y=a+bx,a接近于0,，b接近于1；
(5)校準(zhǔn)：應(yīng)由廠家提供全血校準(zhǔn)物(低檔儀器用校準(zhǔn)顆粒及HGB校準(zhǔn)液)進行校準(zhǔn),；
(6)上述指標(biāo)必須符合該儀器的出廠指標(biāo),，才算驗收合格。由驗收小組成員,、安裝工程師及設(shè)備科同志簽字后存檔,。
四．如何對血細胞分析儀進行校準(zhǔn)
儀器經(jīng)使用一個階段后應(yīng)該作一次全面的校準(zhǔn)，因為儀器本身是個比較器,。一旦儀器產(chǎn)生漂移將帶來分析誤差及不精密度,，所以儀器應(yīng)該經(jīng)常定期校準(zhǔn)。
1．儀器校準(zhǔn)前準(zhǔn)備：徹底清洗管道,，去除管道中的殘留血液,、吸附的蛋白和纖維等，然后測定試劑空白,，本底必須符合要求,。
2．校準(zhǔn)物準(zhǔn)備：檢查校準(zhǔn)物是否在有效期內(nèi),，外觀有無變質(zhì)。從冰箱中取出后,，必須平衡至室溫,，輕輕混勻，小心打開瓶蓋,，勿使血液濺出,，分裝成兩瓶。
3．在儀器上測定校準(zhǔn)物,，連續(xù)測定11次,。第1次結(jié)果棄置不用，將2至11次結(jié)果計算出XS,，絕對誤差,，相對誤差。
4．核對實測結(jié)果與校準(zhǔn)物所示結(jié)果,，檢查實測結(jié)果有無升高或下降的趨向性,。
5．判斷校準(zhǔn)結(jié)果：校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)要求如下表1。(1)如果各參數(shù)的絕對值誤差和相對誤差小于一級要求,，屬合格范圍,，不須作任何校準(zhǔn)。(2)如果參數(shù)大于一級要求,，小于二級要求,，可按說明書要求調(diào)整系數(shù)。當(dāng)調(diào)整后,，可再測定另一瓶全血標(biāo)準(zhǔn)物,，理應(yīng)達到小于一級要求水平。(3)如果結(jié)果大于二級要求,，則需通知廠家派工程師修理或調(diào)整,，為保證病人標(biāo)本測試質(zhì)量，該儀器應(yīng)暫停使用,。
表1校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)要求
絕對誤差相對誤差
一級要求二級要求
WBC 0.1×109/l0.4×109/l1.25%5%
RBC 0.03×1012/l0.08×1012/l0.7%8.0%
HGB 1g/l8g/l0.78%3.0%
HCT 0.8%1.7%2.0%4.5%
MCV 1.0fl8.0fl1.18%2.5%
PLT 6.0×109/l20.0×109/l2.7%9.0%
MPV 0.50fl8.0fl5%20%
五．使用血細胞分析儀的注意事項
為了保證使用血細胞分析儀得出的結(jié)果能夠盡量反映病人的真實情況,，在使用時必須注意以下幾方面：
1．血樣：由于靜脈血受外界因素影響較小，成份比較穩(wěn)定,，檢測結(jié)果準(zhǔn)確度高重復(fù)性好,，因此除嬰兒外，建議取血者均應(yīng)采用靜脈血,。如果采集未梢血時，注意不可局部過度擠壓,，避免血液中混入大量的組織液,，而且易激活凝血系統(tǒng)產(chǎn)生局部凝血,，導(dǎo)致檢測結(jié)果的誤差；第一滴血由于細胞成分不穩(wěn)定應(yīng)棄掉,，用第二滴血進行檢測,。
2．抗凝：使用拘櫞酸鹽抗凝劑時間過長易結(jié)晶，細胞形態(tài)易發(fā)生變化,，影響計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性,；草酸鹽易使血小板產(chǎn)生凝集，并可使白細胞形態(tài)發(fā)生變化,，影響計數(shù)結(jié)果及分類,；而肝素抗凝過量易引起白細胞凝集和血小板減少；EDTA-2Na較EDTA-2K的可溶性低,，血小板凝集的可能性大,。因此國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(ICSH)1993年發(fā)表的文件中建議使用EDTA-2K作為血細胞分析儀的抗凝劑，用量為1.5～2.2mg/ml血,。
3．采血后用塞子密閉,，室溫保存不超過6小時。
4．稀釋：稀釋器,、吸樣管要經(jīng)過校準(zhǔn),。吸血后吸樣管外的血液要完全擦干凈。血液稀釋后要盡快測定,，否則易引起“稀釋性溶血”,。
5．混勻：檢測前混勻很重要，如果無旋轉(zhuǎn)式混勻器應(yīng)顛倒混勻至少8次,。
6．試劑：血細胞分析儀對試劑的要求非常嚴(yán)格,，要求有嚴(yán)格的滲透壓標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定的導(dǎo)電率,、高標(biāo)準(zhǔn)的純凈度以及對儀器管道和閥路無腐蝕作用,。因此溶血劑、稀釋液及清洗劑等最好選用原廠配套產(chǎn)品,。
7．白細胞分類：首先必須明確,，迄今為止，世界上無論多先進的血細胞分析儀,，進行的白細胞分類都只是一種過篩手段,，并不能完全取代人工鏡檢分類。要堅決糾正有些單位用了血細胞分析儀就丟掉鏡檢的錯誤思想,。
8．質(zhì)量控制：血液分析必須建立嚴(yán)格的質(zhì)量控制制度,，才能保證結(jié)果的可靠性。
六．現(xiàn)代血細胞分析儀的主要進展
隨著高科技的引用和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,，各種先進的血細胞分析測試技術(shù)被應(yīng)用到血細胞分析儀上,。1987年Coulter公司發(fā)明的VCS(Volume,，V，體積,；Conductivity,，C，電導(dǎo)性,；Scatter,，S，光散射)技術(shù)可使血細胞未經(jīng)任何處理,，在與體內(nèi)形態(tài)完全相同的自然狀態(tài)下得出檢測結(jié)果,。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血細胞分析儀中采用了阻抗和射頻技術(shù)聯(lián)合的白細胞分類法。進入90年代后,，儀器的自動化程度增高(達到120份/小時),；可進行多參數(shù)分析(高達30余項)；精密度高(重復(fù)計數(shù),；保證微孔管清潔,；取中段血；運動流式細胞計數(shù)原理,；鞘流原理……),；向5分類及鑒別幼稚細胞發(fā)展；準(zhǔn)確度好,，全面質(zhì)量管理,，保證儀器檢測可靠性；具有智能化,，可對同一病人診斷的前后進行對比,，提出綜合意見，確定診斷方向,；更加注意保護操作人員的安全(SLS-Hb,、自動混勻、進樣,、吸樣針內(nèi)外清洗等),；向流水線發(fā)展，將血細胞分析儀,、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)儀,、推片、染色機聯(lián)成流水操作線,。
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