1．基本原理先將標(biāo)準(zhǔn)物或血樣品與抗血清混勻,，免疫反應(yīng)6～24h，使抗原與抗體充分結(jié)合,，甚至達(dá)到平衡,，然后再加入標(biāo)記抗原，與抗體反應(yīng)12～24h,，最后分離B與F,，這稱為順序飽和分析法。
應(yīng)用順序飽和加樣,，可以提高測(cè)定方法的靈敏度,。Utiger在做人促甲狀腺激素（TSH）放射免疫分析時(shí)，將標(biāo)記物延至第2天加入,，發(fā)現(xiàn)其靈敏度增加兩倍,。如果縮短最后的溫育時(shí)間，仍可取得滿意的結(jié)果,。所以一般認(rèn)為,，在順序飽和加樣中，第1次溫育時(shí)間可以長(zhǎng),，而第2次溫育時(shí)間要短,，這樣可以提高靈敏度。但也有相反的意見,，認(rèn)為順序飽和加樣,，是使用過量抗體，會(huì)使靈敏度受到一定影響,。如果使用抗體不過量,，溫育時(shí)間縮短，在抗原和抗體結(jié)合未達(dá)到平衡飽和時(shí)就加入標(biāo)記物,，這樣既不影響加靈敏度,，反而比較穩(wěn)定,，甚至可提高靈敏度。
2．加樣程序 以人血漿精氨酸加壓素RIA測(cè)定程序?yàn)槔ㄖ苯訙y(cè)定）,。
?。?）加樣（單位μl；總反應(yīng)體積600μl）
?。?）孵育：4℃,，24h。
?。?）分離B與F。
無肽血漿,，用于血漿的直接測(cè)定,。其制備方法為：在電磁攪拌下，抽取2%加膜活性炭溶液5ml,，共兩管,，離心、去上清,。血漿5ml,，倒入上述活性炭管中，加蓋,，充分振蕩10min,，離心，上清倒入上述另一活性炭管中,，振蕩10min,，再離心，取上清,，即無肽血漿,。血漿中的生物活性物質(zhì)被活性炭吸附而去除。
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