五分類血液分析儀和三分群血液分析儀相比,，由于增加了對嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞的常規(guī)檢測,，更能滿足臨床需要,，因此將逐漸進(jìn)入各級醫(yī)院檢驗(yàn)科 為能選擇一臺適合自己醫(yī)院的五分類血液分析儀，現(xiàn)對五分類血液分析儀的白細(xì)胞分類原理和代表型號做簡要分析,。
1 電阻抗,、高頻電導(dǎo)及激光散射聯(lián)合檢測法即庫爾特公司的VCS技術(shù)．V：代表體積容量(volume)也就是庫爾特首創(chuàng)發(fā)明的電阻抗原理．把電阻法微孔技術(shù)應(yīng)用于計(jì)數(shù)血細(xì)胞和測定其體積的大小。C：代表傳導(dǎo)性即電導(dǎo)(conductivity)．指一束電磁波或稱射頻．穿透細(xì)胞的傳導(dǎo)性,，它取決于細(xì)胞的大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu),；經(jīng)校正后的傳導(dǎo)性叫opacity即“不透明性”．這時不再反映細(xì)胞大小．而是反映細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)．像核的大小,，核漿比例和密度等,。S：代表散射(scatter)．指在不同角度測得的散射光強(qiáng)度。由于各類細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)不同和顆粒大小不同而對光的散射各異,，進(jìn)而區(qū)分各類細(xì)胞,。庫爾特公司設(shè)計(jì)在單一通道上同時用這三種方法對同一白細(xì)胞進(jìn)行測量，避免了有些血液分析儀要設(shè)計(jì)好幾個通道或加染色試劑的麻煩。儀器具體的運(yùn)作是：根據(jù)流體力學(xué)的原理,，應(yīng)用鞘流技術(shù)使溶血后剩余的白細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞單個通過檢測器,，接受VCS三種技術(shù)的同時檢測，完成白細(xì)胞分類過程,。VCS技術(shù)在Coulter公司的STKS型,、MAXM 型以及Gen．s型五分類血液分析儀上均已成功的應(yīng)用。而且MAXM 型和Gen．s型可計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞,，Gel1．S型可選配自動制血片機(jī),。以上幾種型號還可直接計(jì)數(shù)CD 和CD。淋巴細(xì)胞,，并算出其比率。
2 光散射和細(xì)胞化學(xué)染色聯(lián)合檢測法
即利用激光散射和過氧化物酶染色技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分類,。利用光散射的原理計(jì)數(shù)血細(xì)胞,，因細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)不同，在不同角度上散射光有差別,，有助于對白細(xì)胞的區(qū)分,。白細(xì)胞化學(xué)染色即是在稀釋液中加入過氧化酶(MPO)的底物及現(xiàn)色劑，根據(jù)白細(xì)胞對MP0的反應(yīng)分類,。中性細(xì)胞MP0 為強(qiáng)陽性,，嗜酸性細(xì)胞陽性更強(qiáng)，單核細(xì)胞為弱陽性,，淋巴細(xì)胞性,，嗜堿性細(xì)胞亦為陰性，故綜合光散射和細(xì)胞化學(xué)染色的特點(diǎn),，在電腦顯示屏上可得到類似流式細(xì)胞儀的二維或三維圖像一一不同顏色的散點(diǎn)圖．并可打出分類結(jié)果,。由于嗜堿性細(xì)胞不含此酶，不能被檢測．因此一些儀器專門設(shè)置了嗜堿性細(xì)胞檢測系統(tǒng)．它的測量通道采用時間差的方法,，與RBC／PLT的測量系統(tǒng)共用一個通道,。在激光技術(shù)中目前有半導(dǎo)體激光和氣體激光。半導(dǎo)體激光功率弱,，但作為細(xì)胞分類自己足夠,；氣體激光功率強(qiáng) 二者比較半導(dǎo)體激光具有壽命長(7～1O年)體積小，啟動快．耗電小,，對穩(wěn)壓要求低,，更為’經(jīng)濟(jì)適用等特點(diǎn)。Bayer公司的的ADVIA 120型和2120型血細(xì)胞分析儀是用光散射原理進(jìn)行血細(xì)胞分析的代表,。Sysmex公司的SF-3000型血細(xì)胞分析儀也用此原理進(jìn)行工作,。
3 電阻抗和射頻電導(dǎo)聯(lián)合檢測法
這種方法是分別采用四個檢測系統(tǒng)來檢測不同類型的細(xì)胞① 淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞檢測系統(tǒng)：在細(xì)胞懸浮淮中加入溶血劑使紅細(xì)胞溶解,，而使白細(xì)胞保持完整,，細(xì)胞漿及核形態(tài)近似于生理狀態(tài),，當(dāng)這些細(xì)胞通過檢測系統(tǒng)時，對白細(xì)胞進(jìn)行電阻抗法(測量細(xì)胞體積)和射頻電導(dǎo)法(檢測細(xì)胞核和顆粒密度)的聯(lián)合檢測,，結(jié)果將細(xì)胞分成淋巴細(xì)胞,、單核細(xì)和中性粒細(xì)胞三個群體。② 嗜酸性細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞兩種檢測系統(tǒng)：在細(xì)胞懸浮液中加入特殊的溶血劑,，除嗜酸性細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞外,，其他細(xì)胞均被溶解或萎縮．再對保持完整的嗜酸性細(xì)胞或嗜堿性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。③幼稚細(xì)胞檢測系統(tǒng)：在細(xì)胞懸浮液中加入硫化氨基酸,，由于占位不同,，結(jié)合在幼稚細(xì)胞的氨基酸比成熟細(xì)胞多．且對溶血劑有抵抗作用，當(dāng)加入溶血劑時．成熟細(xì)胞被溶解,，只保留著可能存在的幼稚細(xì)胞用來計(jì)數(shù),。Sysmex公司的SE一9000血細(xì)胞分析儀就是采用這種方法進(jìn)行五分類的。該儀器可顯示及打印四個直方圖,、兩個散點(diǎn)圖．一個報(bào)告表以及FLAG信息等,。但該儀器配套的Labman中文軟件卻無法打印散點(diǎn)圖。SE一9000血細(xì)胞分析儀有監(jiān)測造血干細(xì)胞的功能,。SE一9000血細(xì)胞分析儀和該公司研制的SP100自動制片染色機(jī)以及R3000／2000網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀組合起來,，加上一個電腦工作站．構(gòu)成一套該公司稱為HST的系列，即可形成全部血細(xì)胞分析自動化系統(tǒng),。
4 多角度激光偏振光散射檢測法
采用這種技術(shù)的儀器使用鞘流液將標(biāo)本血稀釋,，稀釋后白細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài)，只有嗜堿性細(xì)胞由于其吸濕的特性而使細(xì)胞結(jié)構(gòu)有輕微改變,。紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白在高滲透壓的作用下．從細(xì)胞中分離出來,。而鞘流的水分則進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)．使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)仍然完整，它與鞘流的折光系數(shù)相同,，不影響白細(xì)胞的檢測,。儀器同時從四個角度來檢測通過激光束的細(xì)胞所產(chǎn)生的散射光，因?yàn)榧?xì)胞大小,、折射指數(shù),、核形、核漿比率以及顆粒性質(zhì)等,，均可影響在不同角度測得的散射光量,。O。前角散射光用來測定細(xì)胞的體積,，1O,。狹角散射光用來測定細(xì)胞結(jié)構(gòu)．9O。垂直散射光對細(xì)胞內(nèi)部顆粒及細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行測量，9O,。消偏振光散射將嗜酸性細(xì)胞從中性粒細(xì)胞和其它細(xì)胞中分離出來,。所有原始數(shù)據(jù)，借助先進(jìn)的電腦軟件處理,，在屏幕上顯示6個散點(diǎn)圖和2個直方圖,。
ABBOTT 公司的CD一3000型，CD一3500型血細(xì)胞分析儀采用了此技術(shù),。為了解決新生兒紅細(xì)胞對溶血劑抵抗的問題,，該儀器還設(shè)計(jì)了一種新的專用試劑，為該儀器所特有,。值得一提的是市面上偶見假五分類血球儀,。假五分類血球儀則不用上述原理分析血細(xì)胞成分，更多的使用電腦軟件的分析而得出五分類結(jié)果,。分辨經(jīng)驗(yàn)是真五分類技術(shù)的血球儀如果是試劑法,，溶血素不應(yīng)該少于四種，如果是激光法．溶血素不少于三種,。在五分類血液分析儀的具體技術(shù)上，每家廠商．每種型號都有自己的特點(diǎn),、長處,。比如兩臺血細(xì)胞儀器，一臺對于大多數(shù)環(huán)境,、各種標(biāo)本都能適應(yīng),，都能出結(jié)果，可結(jié)果不一定可靠,。另一臺就要求嚴(yán)格,，對于一些異常就不出結(jié)果，但出的結(jié)果就比較可靠,。若一臺儀器將物理,、化學(xué)、特殊通道,、先進(jìn)技術(shù)集一身 測定指標(biāo)一定很多,，儀器一定很貴，收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)也高,，故不適合門診篩查,。
選儀器要符合醫(yī)院的要求，比如是偏重質(zhì)量,，還是速度,，還是操作，還是價(jià)格等等。筆者建議一般綜合醫(yī)院門診．選擇染色后激光分類就夠了,，因這種儀器分類已準(zhǔn)確,，且價(jià)格便宜．消耗便宜；若是為兒科血液科血液分析專用儀器,，那就一定要買有網(wǎng)織細(xì)胞,，能識別幼稚細(xì)胞，有光學(xué)血小板測定者更好,；若是要測造血干細(xì)胞就一定要買FDA(美國食品與藥
物管理局)iX可的儀器,。近年來，實(shí)驗(yàn)室全自動化進(jìn)入檢驗(yàn)科,。因此選購儀器時還要考慮該儀器與標(biāo)本前處理是否能相接,，與標(biāo)本傳輸系統(tǒng)能否相接．與網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)能否相接，能否實(shí)現(xiàn)血液分析的全自動化,。最后要強(qiáng)調(diào)的是儀器的好與壞,，除與儀器本身性能有關(guān)還取決于會不會真正使用儀器的人。
http://bbs.aibaoyl.com/
1 電阻抗,、高頻電導(dǎo)及激光散射聯(lián)合檢測法即庫爾特公司的VCS技術(shù)．V：代表體積容量(volume)也就是庫爾特首創(chuàng)發(fā)明的電阻抗原理．把電阻法微孔技術(shù)應(yīng)用于計(jì)數(shù)血細(xì)胞和測定其體積的大小。C：代表傳導(dǎo)性即電導(dǎo)(conductivity)．指一束電磁波或稱射頻．穿透細(xì)胞的傳導(dǎo)性,，它取決于細(xì)胞的大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu),；經(jīng)校正后的傳導(dǎo)性叫opacity即“不透明性”．這時不再反映細(xì)胞大小．而是反映細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)．像核的大小,，核漿比例和密度等,。S：代表散射(scatter)．指在不同角度測得的散射光強(qiáng)度。由于各類細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)不同和顆粒大小不同而對光的散射各異,，進(jìn)而區(qū)分各類細(xì)胞,。庫爾特公司設(shè)計(jì)在單一通道上同時用這三種方法對同一白細(xì)胞進(jìn)行測量，避免了有些血液分析儀要設(shè)計(jì)好幾個通道或加染色試劑的麻煩。儀器具體的運(yùn)作是：根據(jù)流體力學(xué)的原理,，應(yīng)用鞘流技術(shù)使溶血后剩余的白細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞單個通過檢測器,，接受VCS三種技術(shù)的同時檢測，完成白細(xì)胞分類過程,。VCS技術(shù)在Coulter公司的STKS型,、MAXM 型以及Gen．s型五分類血液分析儀上均已成功的應(yīng)用。而且MAXM 型和Gen．s型可計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞,，Gel1．S型可選配自動制血片機(jī),。以上幾種型號還可直接計(jì)數(shù)CD 和CD。淋巴細(xì)胞,，并算出其比率。
2 光散射和細(xì)胞化學(xué)染色聯(lián)合檢測法
即利用激光散射和過氧化物酶染色技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分類,。利用光散射的原理計(jì)數(shù)血細(xì)胞,，因細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)不同，在不同角度上散射光有差別,，有助于對白細(xì)胞的區(qū)分,。白細(xì)胞化學(xué)染色即是在稀釋液中加入過氧化酶(MPO)的底物及現(xiàn)色劑，根據(jù)白細(xì)胞對MP0的反應(yīng)分類,。中性細(xì)胞MP0 為強(qiáng)陽性,，嗜酸性細(xì)胞陽性更強(qiáng)，單核細(xì)胞為弱陽性,，淋巴細(xì)胞性,，嗜堿性細(xì)胞亦為陰性，故綜合光散射和細(xì)胞化學(xué)染色的特點(diǎn),，在電腦顯示屏上可得到類似流式細(xì)胞儀的二維或三維圖像一一不同顏色的散點(diǎn)圖．并可打出分類結(jié)果,。由于嗜堿性細(xì)胞不含此酶，不能被檢測．因此一些儀器專門設(shè)置了嗜堿性細(xì)胞檢測系統(tǒng)．它的測量通道采用時間差的方法,，與RBC／PLT的測量系統(tǒng)共用一個通道,。在激光技術(shù)中目前有半導(dǎo)體激光和氣體激光。半導(dǎo)體激光功率弱,，但作為細(xì)胞分類自己足夠,；氣體激光功率強(qiáng) 二者比較半導(dǎo)體激光具有壽命長(7～1O年)體積小，啟動快．耗電小,，對穩(wěn)壓要求低,，更為’經(jīng)濟(jì)適用等特點(diǎn)。Bayer公司的的ADVIA 120型和2120型血細(xì)胞分析儀是用光散射原理進(jìn)行血細(xì)胞分析的代表,。Sysmex公司的SF-3000型血細(xì)胞分析儀也用此原理進(jìn)行工作,。
3 電阻抗和射頻電導(dǎo)聯(lián)合檢測法
這種方法是分別采用四個檢測系統(tǒng)來檢測不同類型的細(xì)胞① 淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞檢測系統(tǒng)：在細(xì)胞懸浮淮中加入溶血劑使紅細(xì)胞溶解,，而使白細(xì)胞保持完整,，細(xì)胞漿及核形態(tài)近似于生理狀態(tài),，當(dāng)這些細(xì)胞通過檢測系統(tǒng)時，對白細(xì)胞進(jìn)行電阻抗法(測量細(xì)胞體積)和射頻電導(dǎo)法(檢測細(xì)胞核和顆粒密度)的聯(lián)合檢測,，結(jié)果將細(xì)胞分成淋巴細(xì)胞,、單核細(xì)和中性粒細(xì)胞三個群體。② 嗜酸性細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞兩種檢測系統(tǒng)：在細(xì)胞懸浮液中加入特殊的溶血劑,，除嗜酸性細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞外,，其他細(xì)胞均被溶解或萎縮．再對保持完整的嗜酸性細(xì)胞或嗜堿性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。③幼稚細(xì)胞檢測系統(tǒng)：在細(xì)胞懸浮液中加入硫化氨基酸,，由于占位不同,，結(jié)合在幼稚細(xì)胞的氨基酸比成熟細(xì)胞多．且對溶血劑有抵抗作用，當(dāng)加入溶血劑時．成熟細(xì)胞被溶解,，只保留著可能存在的幼稚細(xì)胞用來計(jì)數(shù),。Sysmex公司的SE一9000血細(xì)胞分析儀就是采用這種方法進(jìn)行五分類的。該儀器可顯示及打印四個直方圖,、兩個散點(diǎn)圖．一個報(bào)告表以及FLAG信息等,。但該儀器配套的Labman中文軟件卻無法打印散點(diǎn)圖。SE一9000血細(xì)胞分析儀有監(jiān)測造血干細(xì)胞的功能,。SE一9000血細(xì)胞分析儀和該公司研制的SP100自動制片染色機(jī)以及R3000／2000網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀組合起來,，加上一個電腦工作站．構(gòu)成一套該公司稱為HST的系列，即可形成全部血細(xì)胞分析自動化系統(tǒng),。
4 多角度激光偏振光散射檢測法
采用這種技術(shù)的儀器使用鞘流液將標(biāo)本血稀釋,，稀釋后白細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài)，只有嗜堿性細(xì)胞由于其吸濕的特性而使細(xì)胞結(jié)構(gòu)有輕微改變,。紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白在高滲透壓的作用下．從細(xì)胞中分離出來,。而鞘流的水分則進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)．使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)仍然完整，它與鞘流的折光系數(shù)相同,，不影響白細(xì)胞的檢測,。儀器同時從四個角度來檢測通過激光束的細(xì)胞所產(chǎn)生的散射光，因?yàn)榧?xì)胞大小,、折射指數(shù),、核形、核漿比率以及顆粒性質(zhì)等,，均可影響在不同角度測得的散射光量,。O。前角散射光用來測定細(xì)胞的體積,，1O,。狹角散射光用來測定細(xì)胞結(jié)構(gòu)．9O。垂直散射光對細(xì)胞內(nèi)部顆粒及細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行測量，9O,。消偏振光散射將嗜酸性細(xì)胞從中性粒細(xì)胞和其它細(xì)胞中分離出來,。所有原始數(shù)據(jù)，借助先進(jìn)的電腦軟件處理,，在屏幕上顯示6個散點(diǎn)圖和2個直方圖,。
ABBOTT 公司的CD一3000型，CD一3500型血細(xì)胞分析儀采用了此技術(shù),。為了解決新生兒紅細(xì)胞對溶血劑抵抗的問題,，該儀器還設(shè)計(jì)了一種新的專用試劑，為該儀器所特有,。值得一提的是市面上偶見假五分類血球儀,。假五分類血球儀則不用上述原理分析血細(xì)胞成分，更多的使用電腦軟件的分析而得出五分類結(jié)果,。分辨經(jīng)驗(yàn)是真五分類技術(shù)的血球儀如果是試劑法,，溶血素不應(yīng)該少于四種，如果是激光法．溶血素不少于三種,。在五分類血液分析儀的具體技術(shù)上，每家廠商．每種型號都有自己的特點(diǎn),、長處,。比如兩臺血細(xì)胞儀器，一臺對于大多數(shù)環(huán)境,、各種標(biāo)本都能適應(yīng),，都能出結(jié)果，可結(jié)果不一定可靠,。另一臺就要求嚴(yán)格,，對于一些異常就不出結(jié)果，但出的結(jié)果就比較可靠,。若一臺儀器將物理,、化學(xué)、特殊通道,、先進(jìn)技術(shù)集一身 測定指標(biāo)一定很多,，儀器一定很貴，收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)也高,，故不適合門診篩查,。
選儀器要符合醫(yī)院的要求，比如是偏重質(zhì)量,，還是速度,，還是操作，還是價(jià)格等等。筆者建議一般綜合醫(yī)院門診．選擇染色后激光分類就夠了,，因這種儀器分類已準(zhǔn)確,，且價(jià)格便宜．消耗便宜；若是為兒科血液科血液分析專用儀器,，那就一定要買有網(wǎng)織細(xì)胞,，能識別幼稚細(xì)胞，有光學(xué)血小板測定者更好,；若是要測造血干細(xì)胞就一定要買FDA(美國食品與藥
物管理局)iX可的儀器,。近年來，實(shí)驗(yàn)室全自動化進(jìn)入檢驗(yàn)科,。因此選購儀器時還要考慮該儀器與標(biāo)本前處理是否能相接,，與標(biāo)本傳輸系統(tǒng)能否相接．與網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)能否相接，能否實(shí)現(xiàn)血液分析的全自動化,。最后要強(qiáng)調(diào)的是儀器的好與壞,，除與儀器本身性能有關(guān)還取決于會不會真正使用儀器的人。
http://bbs.aibaoyl.com/
