血液分析儀是目前臨床血液一般檢查最常用的檢測儀器,,以往使用手工操作顯微鏡計(jì)數(shù)方法,由于操作過程的隨機(jī)誤差,,實(shí)驗(yàn)器材的系統(tǒng)錯(cuò)誤和檢測方法的固有誤差,,使顯微鏡法細(xì)胞計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性受到很大影響。20世紀(jì)40年代期,,美國人庫爾特先生發(fā)明并申請(qǐng)了粒子計(jì)數(shù)技術(shù)的設(shè)計(jì)專利,;50世紀(jì)初期,電子血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀開始應(yīng)用于臨床,,開創(chuàng)了血細(xì)胞分析儀的新紀(jì)元,。隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,高新科技的應(yīng)用,,特別是計(jì)算機(jī)技術(shù)的引用,,血細(xì)胞分析儀的分析技術(shù)及臨床應(yīng)用都取得了令人矚目的進(jìn)展。現(xiàn)在的血細(xì)胞分析儀一般能為臨床疾病診斷,、鑒別診斷,、治療和療效觀察提供十幾項(xiàng)至幾十項(xiàng)檢測參數(shù)。進(jìn)入21世紀(jì)以來,,我國的各級(jí)醫(yī)院已基本普及了血細(xì)胞分析儀,,使血細(xì)胞分析的質(zhì)量有了明顯的提高,同時(shí),,過于機(jī)械的工作方式降低了對(duì)專業(yè)知識(shí)的要求,,出現(xiàn)了諸如過分相信儀器結(jié)果等一些問題。現(xiàn)結(jié)合我國血細(xì)胞分析儀使用現(xiàn)狀,,概述在儀器使用中應(yīng)注意的幾個(gè)問題,。
1 標(biāo)本采集及抗凝劑的使用
標(biāo)本采集及抗凝劑的使用是血細(xì)胞分析儀使用前的質(zhì)量控制關(guān)鍵問題,十分重要,,但是人們往往不重視,。血液標(biāo)本采集與抗凝劑對(duì)血細(xì)胞分析結(jié)果的準(zhǔn)確性影響非常大,例如采血不順利或抗凝效果差常導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)減少,;同時(shí),,采血不順利、血標(biāo)本中存在肉眼不易發(fā)現(xiàn)的小凝塊可導(dǎo)致血細(xì)胞分析儀的計(jì)數(shù)孔不完全或完全堵塞,。計(jì)數(shù)孔不完全堵塞,,不容易發(fā)現(xiàn),易造成血標(biāo)本檢測結(jié)果的誤差,。標(biāo)本采集涉及的問題主要是用手指血還是靜脈血?用真空采血器還是普通注射器?推薦使用靜脈血和真空采血管采集標(biāo)本? ,。血細(xì)胞分析最適抗凝劑為EDTA鹽,它對(duì)血細(xì)胞形態(tài)和血小板計(jì)數(shù)影響很小,,國際血液與標(biāo)準(zhǔn)儀委員會(huì)(ICSH)1993年文件建議,,血細(xì)胞分析用EDTA-K2作抗凝劑,,用量為1.5~2.2 mg/mL血液。同時(shí)應(yīng)注意EDTA依賴性血小板聚集可導(dǎo)致假性血小板減少,,主要見于腫瘤,、自身免疫病、肺心病,、晚期妊娠,、肝病、毒血癥及一些不明原因疾病L2J,,遇到上述情況,,應(yīng)該使用草酸銨稀釋液等方法計(jì)數(shù)血小板。
2 血細(xì)胞分析儀對(duì)細(xì)胞分群是過篩手段血細(xì)胞分析儀已從單一的電阻抗技術(shù)發(fā)展成多種技術(shù)包括物理,、化學(xué),、免疫學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)等結(jié)合的全自動(dòng)先進(jìn)儀器,,對(duì)各種血細(xì)胞分析結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠,,自動(dòng)化程度由單一的三壓分群發(fā)展為血細(xì)胞自動(dòng)分析系統(tǒng),即全血細(xì)胞計(jì)數(shù),、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù),、外周血推片和染色等過程的全自動(dòng)化。但是,,至今任何血細(xì)胞分析儀對(duì)血細(xì)胞分群只能是過篩手段,,在存在幼稚細(xì)胞等情況下,,其分析結(jié)果不可靠,,必需行人工顯微鏡復(fù)查。目前,,國內(nèi)許多醫(yī)院檢驗(yàn)科對(duì)于血細(xì)胞計(jì)數(shù)及細(xì)胞直方圖異常時(shí),,基本不復(fù)查或很少行人工顯微鏡復(fù)查,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確,,引發(fā)了不少醫(yī)療投訴,、糾紛。例如某女性發(fā)熱患者到某市級(jí)醫(yī)院看病,,血細(xì)胞分析結(jié)果為白細(xì)胞21.5×10 /L,,血紅蛋白98 g/L,血細(xì)胞直方圖異常,,但檢驗(yàn)科沒有對(duì)其進(jìn)行人工顯微鏡復(fù)查就發(fā)報(bào)告,,臨床醫(yī)生根據(jù)患者發(fā)熱、月經(jīng)過多等癥狀,,診斷為上感及月經(jīng)不調(diào),,治療三個(gè)月后,,未見明顯效果,到上一級(jí)醫(yī)院檢查,,白細(xì)胞已升至30.2×10 /L,,血紅蛋白下降為89 g/L,血細(xì)胞直方圖異常,,經(jīng)人工顯微鏡復(fù)查發(fā)現(xiàn)外周血有35%的幼稚細(xì)胞,,骨髓穿刺細(xì)胞學(xué)診斷為白血病。由此可見,,過于依賴儀器分析結(jié)果,,一方面降低了檢驗(yàn)師們對(duì)專業(yè)知識(shí)的要求,認(rèn)識(shí)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的能力下降了,,另一方面擔(dān)誤患者的診斷治療,。檢驗(yàn)界已意識(shí)到這個(gè)問題的不良后果,《中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》編輯部已專門組織專家召開了“加強(qiáng)形態(tài)學(xué)臨床檢驗(yàn)專家座談會(huì)”,,并提出了解決問題的方案,。因此,在日常工作中,,應(yīng)加強(qiáng)血細(xì)胞分析儀細(xì)胞異常結(jié)果的人工顯微鏡復(fù)查,,確保每一份血常規(guī)檢驗(yàn)報(bào)告的質(zhì)量,特別是避免惡性血液疾病的漏檢,。
3 血細(xì)胞分析結(jié)果的可比性
目前,,國內(nèi)大中型醫(yī)院普通存在多臺(tái)相同或不同生產(chǎn)廠家的血細(xì)胞分析儀,而型號(hào)及試劑不同的檢測系統(tǒng)對(duì)同一標(biāo)本相同項(xiàng)目的檢測結(jié)果間的差異,,有時(shí)會(huì)遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于可接受的誤差范圍,。張文等對(duì)7個(gè)不同的血細(xì)胞分析儀測定白細(xì)胞結(jié)果進(jìn)行比對(duì),發(fā)現(xiàn)其檢測的白細(xì)胞精密度符合臨床要求,,但臨床可接受性能評(píng)價(jià)存在不可比性,,需要采取整改措施 。
整改措施主要涉及血細(xì)胞分析儀質(zhì)量控制及校正問題,,衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心已開始建立和逐漸完善我國血細(xì)胞分析溯源體系,,并且準(zhǔn)備在全國范圍內(nèi)推廣應(yīng)用,這將對(duì)血細(xì)胞分析的質(zhì)量控制與校準(zhǔn)體系的建立發(fā)揮重要作用,。但是,,血細(xì)胞
分析的質(zhì)量控制與校準(zhǔn)體系的建立還面臨許多困難,如血細(xì)胞分析的質(zhì)控做準(zhǔn)品有效期短,、價(jià)格貴,、難以按期得到等因素導(dǎo)致其難以常規(guī)開展 。血細(xì)胞分析的校準(zhǔn)品主要有商業(yè)校正品和定值新鮮全血,,商業(yè)校正品對(duì)其配套的血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)結(jié)果理想,,而對(duì)非配套儀器的校準(zhǔn)結(jié)果較差,。使用新鮮全血對(duì)血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果的比對(duì)和校準(zhǔn),多數(shù)進(jìn)行的是其可行性研究,。研究證明新鮮全血適用于不同型號(hào)血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn),,特別是不易獲得配套校準(zhǔn)品的儀器,成本較低,,適用性強(qiáng),。
4 結(jié)語
為了提高血液分析儀檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,實(shí)行全面質(zhì)量控制及校正至關(guān)重要,。血標(biāo)本的正確采集,、抗凝劑的合理使用是分析前的關(guān)鍵,對(duì)異常的細(xì)胞計(jì)算結(jié)果,、直方圖異常者應(yīng)該加強(qiáng)人工顯微鏡復(fù)查,,完善血細(xì)胞分析溯源體系,探討符合909 我國實(shí)際的標(biāo)準(zhǔn)化方案確保分析結(jié)果的一致性,,建立一些參考檢測系統(tǒng)或?qū)嶒?yàn)室,。而選擇合格的新鮮全血對(duì)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行比對(duì)是一種成本較低、適用性強(qiáng)的提高不同血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果可比性的方法,。
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