特種蛋白分析儀是近年來(lái)國(guó)內(nèi)常購(gòu)的臨床檢驗(yàn)設(shè)備,。其實(shí)特定蛋白的分析無(wú)論從思路還是技術(shù)上都不能算是新東東,。由于觀念和臨床運(yùn)用的滯后,使其在國(guó)內(nèi)成了新生事物,。
使用單一專門(mén)化的儀器在國(guó)外比較普遍,,對(duì)于一些非專門(mén)化的儀器也常用作單一的測(cè)定,,如色譜儀,,眾所周知只要更換分離柱,可以測(cè)定多種的成分,,但在國(guó)外實(shí)驗(yàn)室里常用有數(shù)十臺(tái)的色譜儀以避免和減少柱的更換,。這樣做的好處很明顯:首先,能提高效率,。由于國(guó)外人工成本很高,,提高效率成了降低成本的關(guān)鍵,從經(jīng)濟(jì)角度是合算的,,而國(guó)內(nèi)人工成本低,,因而缺少這種意識(shí)。其次,,能提高檢測(cè)質(zhì)量,。使用專用儀器可以充分考慮到影響因素,從而在設(shè)計(jì),、使用上盡量減少誤差提高檢測(cè)量,。即使是非專用儀器專用,也可以減少誤差,,并節(jié)約保養(yǎng)和標(biāo)定成本,。
就特種蛋白分析儀本身的歷史和分析原理看,也很古老,,當(dāng)然隨著技術(shù)的發(fā)展,,檢測(cè)的項(xiàng)目在不斷增加。就儀器而言,,在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上的相當(dāng)一部分是國(guó)外八十年代,,甚至七十年代的產(chǎn)品。
特種蛋白分析儀的檢測(cè)原理基本上是免疫比濁一統(tǒng)天下,,差別僅在于結(jié)構(gòu)方式上??梢哉f(shuō),,一般生化分析儀也能做(當(dāng)然結(jié)果差不少),。比濁檢測(cè)是很古老的檢測(cè)方式,在眾多比色分析法中,,比濁法是最不具備,,光學(xué)特異性的,因此應(yīng)用很少,。但由于對(duì)特殊蛋白的測(cè)定要求反應(yīng)特異性很高,,需使用抗原抗體反應(yīng)的特異性才能達(dá)到要求。而比濁法在酶標(biāo)技術(shù)產(chǎn)生前是免疫技術(shù)的基本檢測(cè)手段,,如單擴(kuò),,雙擴(kuò)都是通過(guò)比濁來(lái)定性或半定量檢測(cè)的。這了定量,,專門(mén)為比濁生產(chǎn)的儀器就出現(xiàn)了,,即如今特種蛋白分析儀的前身。
比濁法原理:利用光線散射原理,,根據(jù)雷利散射公式,,在一定條件下,透射光與微粒濃度成正比,,散射光與微粒濃度成反比,。(只適用于低濁度溶液)
特種蛋白分析儀從結(jié)構(gòu)上主要分為透射比濁和散射比濁。
透射比濁,,測(cè)定的是透射光和濁度的關(guān)系,。結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,設(shè)計(jì)容易,,但受入射光影響大,,靈敏度低。
散射比濁,,測(cè)定散射光和濁度的關(guān)系,。靈敏度較高,但散射光因微粒大小和性質(zhì)不同,,可呈非均向散射,,即不同的角度散射光的強(qiáng)度是不同的,因此利用散射比濁,,不同的角度測(cè)定特性不同,。大致說(shuō)來(lái),前散射因受血清中白蛋白,,脂蛋白的影響小而常用,,但不能排除乳糜的干擾。
影響免疫比濁的因素:1.抗原抗體比例,??乖贵w比例對(duì)復(fù)合物的數(shù)量和顆粒大小關(guān)系極大,,當(dāng)抗體>抗原時(shí)成正相關(guān),當(dāng)抗體<抗原時(shí)成負(fù)相關(guān),。2.抗體純度和效價(jià),。3.增聚劑。在免疫反應(yīng)中,,為增強(qiáng)抗原抗體反應(yīng)常使用增聚劑,,如3-4%的聚乙二醇等,利用其破壞抗原抗體的水化層,,促進(jìn)其靠近反應(yīng),,但如濃度不適合,高了會(huì)影響其它溶質(zhì)或產(chǎn)生非特異性聚集影響結(jié)果,。
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使用單一專門(mén)化的儀器在國(guó)外比較普遍,,對(duì)于一些非專門(mén)化的儀器也常用作單一的測(cè)定,,如色譜儀,,眾所周知只要更換分離柱,可以測(cè)定多種的成分,,但在國(guó)外實(shí)驗(yàn)室里常用有數(shù)十臺(tái)的色譜儀以避免和減少柱的更換,。這樣做的好處很明顯:首先,能提高效率,。由于國(guó)外人工成本很高,,提高效率成了降低成本的關(guān)鍵,從經(jīng)濟(jì)角度是合算的,,而國(guó)內(nèi)人工成本低,,因而缺少這種意識(shí)。其次,,能提高檢測(cè)質(zhì)量,。使用專用儀器可以充分考慮到影響因素,從而在設(shè)計(jì),、使用上盡量減少誤差提高檢測(cè)量,。即使是非專用儀器專用,也可以減少誤差,,并節(jié)約保養(yǎng)和標(biāo)定成本,。
就特種蛋白分析儀本身的歷史和分析原理看,也很古老,,當(dāng)然隨著技術(shù)的發(fā)展,,檢測(cè)的項(xiàng)目在不斷增加。就儀器而言,,在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上的相當(dāng)一部分是國(guó)外八十年代,,甚至七十年代的產(chǎn)品。
特種蛋白分析儀的檢測(cè)原理基本上是免疫比濁一統(tǒng)天下,,差別僅在于結(jié)構(gòu)方式上??梢哉f(shuō),,一般生化分析儀也能做(當(dāng)然結(jié)果差不少),。比濁檢測(cè)是很古老的檢測(cè)方式,在眾多比色分析法中,,比濁法是最不具備,,光學(xué)特異性的,因此應(yīng)用很少,。但由于對(duì)特殊蛋白的測(cè)定要求反應(yīng)特異性很高,,需使用抗原抗體反應(yīng)的特異性才能達(dá)到要求。而比濁法在酶標(biāo)技術(shù)產(chǎn)生前是免疫技術(shù)的基本檢測(cè)手段,,如單擴(kuò),,雙擴(kuò)都是通過(guò)比濁來(lái)定性或半定量檢測(cè)的。這了定量,,專門(mén)為比濁生產(chǎn)的儀器就出現(xiàn)了,,即如今特種蛋白分析儀的前身。
比濁法原理:利用光線散射原理,,根據(jù)雷利散射公式,,在一定條件下,透射光與微粒濃度成正比,,散射光與微粒濃度成反比,。(只適用于低濁度溶液)
特種蛋白分析儀從結(jié)構(gòu)上主要分為透射比濁和散射比濁。
透射比濁,,測(cè)定的是透射光和濁度的關(guān)系,。結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,設(shè)計(jì)容易,,但受入射光影響大,,靈敏度低。
散射比濁,,測(cè)定散射光和濁度的關(guān)系,。靈敏度較高,但散射光因微粒大小和性質(zhì)不同,,可呈非均向散射,,即不同的角度散射光的強(qiáng)度是不同的,因此利用散射比濁,,不同的角度測(cè)定特性不同,。大致說(shuō)來(lái),前散射因受血清中白蛋白,,脂蛋白的影響小而常用,,但不能排除乳糜的干擾。
影響免疫比濁的因素:1.抗原抗體比例,??乖贵w比例對(duì)復(fù)合物的數(shù)量和顆粒大小關(guān)系極大,,當(dāng)抗體>抗原時(shí)成正相關(guān),當(dāng)抗體<抗原時(shí)成負(fù)相關(guān),。2.抗體純度和效價(jià),。3.增聚劑。在免疫反應(yīng)中,,為增強(qiáng)抗原抗體反應(yīng)常使用增聚劑,,如3-4%的聚乙二醇等,利用其破壞抗原抗體的水化層,,促進(jìn)其靠近反應(yīng),,但如濃度不適合,高了會(huì)影響其它溶質(zhì)或產(chǎn)生非特異性聚集影響結(jié)果,。
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