目的:流式細(xì)胞儀開機(jī)程序,、預(yù)設(shè)獲取模式文件,、設(shè)定和調(diào)整、樣品分析,、關(guān)機(jī)程序
一.開機(jī)程序
1.檢查穩(wěn)壓器電源,,打開電源,穩(wěn)定5分鐘,。
2.打開儲(chǔ)液箱,,倒掉廢液,
并在廢液桶中加入400ml漂白水原液,。打開壓力閥,取出鞘液桶,,將鞘液桶加至4/5滿(一般可用三蒸水,,做分選必須用PBS或FACSFlow),合上壓力閥,。確實(shí)蓋緊桶蓋,,檢查所有管路是否妥善安置。
3.將FACSCalibur開關(guān)打開,,此時(shí)儀器功能控制鈕的顯示應(yīng)是STANDBY,,預(yù)熱5-10分鐘。排出過濾器內(nèi)的氣泡,。
4.如果需要打印,打開打印機(jī)電源,。
5.打開電腦,等待屏幕顯示出標(biāo)準(zhǔn)的蘋果標(biāo)志,。
6.執(zhí)行儀器PRIME功能一次,以排除Flow cell中的氣泡,。
7.分析樣品時(shí),,先用FACAFlow 或PBS進(jìn)行HIGH RUN約2分鐘。
?做過分選后,,每次開機(jī)后需沖洗管道:向分選裝置上裝上兩個(gè)50ml離心管,,不接通濃縮系統(tǒng),摁下右下角白色按鈕開始沖洗,。待自動(dòng)停止后接通濃縮裝置,,同上法沖洗一次。
二.預(yù)設(shè)獲取模式文件(Acquisition Template Files)
1.從蘋果標(biāo)志中選擇CELLQuest見一個(gè)新視窗,,可利用此視窗編輯一個(gè)獲取模式文件,。
2.選取屏幕左列繪圖工具中的Dot plot,繪出一個(gè)或多個(gè)Dot Plots(點(diǎn)圖),。從Dot
Plot對(duì)話框中選取Acquisition作為圖形資料來源,,并確定適當(dāng)?shù)膞軸和y軸參數(shù)。
3.選取屏幕左列繪圖工具中的Histogram,,同上法可繪出Histogram(直方圖),。
4.將此視窗命名后儲(chǔ)存于FACStation G3BD Applications CELLQuest Folder
EXP文件夾中,下次進(jìn)行相同實(shí)驗(yàn)時(shí)可直接調(diào)用,。
?本計(jì)算機(jī)中已設(shè)定兩個(gè)模式文件:ACQ和EXP,,儲(chǔ)存于FACStation G3BD Applications CELLQuest
EXP文件夾中,ACQ用于細(xì)胞DNA檢測(cè),,EXP用于細(xì)胞表面標(biāo)志分析,。