目的:流式細胞儀開機程序,、預(yù)設(shè)獲取模式文件、設(shè)定和調(diào)整,、樣品分析,、關(guān)機程序
一.開機程序
1.檢查穩(wěn)壓器電源,打開電源,,穩(wěn)定5分鐘,。
2.打開儲液箱,倒掉廢液,
并在廢液桶中加入400ml漂白水原液,。打開壓力閥,,取出鞘液桶,將鞘液桶加至4/5滿(一般可用三蒸水,,做分選必須用PBS或FACSFlow),,合上壓力閥。確實蓋緊桶蓋,,檢查所有管路是否妥善安置,。
3.將FACSCalibur開關(guān)打開,此時儀器功能控制鈕的顯示應(yīng)是STANDBY,,預(yù)熱5-10分鐘,。排出過濾器內(nèi)的氣泡。
4.如果需要打印,,打開打印機電源,。
5.打開電腦,等待屏幕顯示出標(biāo)準(zhǔn)的蘋果標(biāo)志。
6.執(zhí)行儀器PRIME功能一次,,以排除Flow cell中的氣泡,。
7.分析樣品時,先用FACAFlow 或PBS進行HIGH RUN約2分鐘,。
?做過分選后,,每次開機后需沖洗管道:向分選裝置上裝上兩個50ml離心管,不接通濃縮系統(tǒng),,摁下右下角白色按鈕開始沖洗,。待自動停止后接通濃縮裝置,同上法沖洗一次,。
二.預(yù)設(shè)獲取模式文件(Acquisition Template Files)
1.從蘋果標(biāo)志中選擇CELLQuest見一個新視窗,,可利用此視窗編輯一個獲取模式文件。
2.選取屏幕左列繪圖工具中的Dot plot,,繪出一個或多個Dot Plots(點圖),。從Dot
Plot對話框中選取Acquisition作為圖形資料來源,并確定適當(dāng)?shù)膞軸和y軸參數(shù),。
3.選取屏幕左列繪圖工具中的Histogram,,同上法可繪出Histogram(直方圖),。
4.將此視窗命名后儲存于FACStation G3BD Applications CELLQuest Folder
EXP文件夾中,下次進行相同實驗時可直接調(diào)用,。
?本計算機中已設(shè)定兩個模式文件:ACQ和EXP,,儲存于FACStation G3BD Applications CELLQuest
EXP文件夾中,ACQ用于細胞DNA檢測,,EXP用于細胞表面標(biāo)志分析,。