1,、血清使用時一定需要滅活么,?
答:實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,,或完全沒有作用,甚至因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,,而造成細胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是“小黑點”,,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增,。若非必須,,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間,,更確保血清的質(zhì)量,。
2、細胞冷凍培養(yǎng)基的成分是什么,?
答:動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10%DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95%原來細胞生長用的新鮮培養(yǎng)基均勻混合后的培養(yǎng)基,。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,,必須在使用前先行配制完成,。
3、細胞培養(yǎng)基偶然被凍,,可否繼續(xù)使用,?
答:如果細胞培養(yǎng)基偶然被凍,您應該自然溶解培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生,。如果沒有沉淀產(chǎn)生,,培養(yǎng)基可以正常使用,如果出現(xiàn)沉淀,,只能丟棄這些培養(yǎng)基,。
4、什么是個性化培養(yǎng)基,?它有什么優(yōu)點,?
答:根據(jù)細胞類型、培養(yǎng)方式和生產(chǎn)工藝等特點所定制的培養(yǎng)基,,即個性化培養(yǎng)基,。個性化培養(yǎng)基在國外生物制藥企業(yè)被普遍采用,個性化培養(yǎng)基可以為細胞生長提供充足的營養(yǎng)物質(zhì),,能提高細胞的生長速率,、培養(yǎng)密度、以及延長細胞維持時間,;也可以為細胞生長提供均衡的營養(yǎng)供給,,減少細胞有害代謝物質(zhì)的積累,降低對細胞生長的危害;同時對貼壁細胞而言,,能增加細胞的貼壁性,,并降低培養(yǎng)過程中剪切力對細胞的損傷;個性化培養(yǎng)基可以根據(jù)客戶的特殊需求減少或不使用動物源成分,,從而使生物制品安全性更有保障,。
5、無血清培養(yǎng)與有血清培養(yǎng)使用的抗生素量一樣嗎,?
答:當在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時,,降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。因為血清中的蛋白會結合和滅活一些抗生素,。而在無血清培養(yǎng)條件下,,抗生素不被滅活。