1,、血清使用時(shí)一定需要滅活么,?
答:實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),,或完全沒(méi)有作用,甚至因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低,。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。若非必須,,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間,,更確保血清的質(zhì)量,。
2、細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基的成分是什么,?
答:動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10%DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用的新鮮培養(yǎng)基均勻混合后的培養(yǎng)基,。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,,必須在使用前先行配制完成,。
3,、細(xì)胞培養(yǎng)基偶然被凍,可否繼續(xù)使用,?
答:如果細(xì)胞培養(yǎng)基偶然被凍,,您應(yīng)該自然溶解培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒(méi)有沉淀產(chǎn)生,,培養(yǎng)基可以正常使用,,如果出現(xiàn)沉淀,只能丟棄這些培養(yǎng)基,。
4,、什么是個(gè)性化培養(yǎng)基?它有什么優(yōu)點(diǎn),?
答:根據(jù)細(xì)胞類型,、培養(yǎng)方式和生產(chǎn)工藝等特點(diǎn)所定制的培養(yǎng)基,即個(gè)性化培養(yǎng)基,。個(gè)性化培養(yǎng)基在國(guó)外生物制藥企業(yè)被普遍采用,,個(gè)性化培養(yǎng)基可以為細(xì)胞生長(zhǎng)提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),能提高細(xì)胞的生長(zhǎng)速率,、培養(yǎng)密度,、以及延長(zhǎng)細(xì)胞維持時(shí)間;也可以為細(xì)胞生長(zhǎng)提供均衡的營(yíng)養(yǎng)供給,,減少細(xì)胞有害代謝物質(zhì)的積累,,降低對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的危害;同時(shí)對(duì)貼壁細(xì)胞而言,,能增加細(xì)胞的貼壁性,,并降低培養(yǎng)過(guò)程中剪切力對(duì)細(xì)胞的損傷;個(gè)性化培養(yǎng)基可以根據(jù)客戶的特殊需求減少或不使用動(dòng)物源成分,,從而使生物制品安全性更有保障,。
5、無(wú)血清培養(yǎng)與有血清培養(yǎng)使用的抗生素量一樣嗎,?
答:當(dāng)在無(wú)血清培養(yǎng)基中添加抗生素時(shí),,降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。因?yàn)檠逯械牡鞍讜?huì)結(jié)合和滅活一些抗生素,。而在無(wú)血清培養(yǎng)條件下,,抗生素不被滅活。