一項旨在抑制成熟小麥在連續(xù)陰雨天發(fā)芽的小麥轉基因技術,,2004年6月上旬在河南農(nóng)業(yè)大學進行了中試,,利用該項技術培育的轉基因抗穗發(fā)芽小麥新品系也同時在河南省進行中試。專家認為,,小麥抗穗發(fā)芽技術的研制成功及其推廣應用,,將對我國小麥的安全生產(chǎn)發(fā)揮積極作用。
據(jù)介紹,,小麥收獲前遇雨發(fā)生穗發(fā)芽的現(xiàn)象是世界主要小麥生產(chǎn)國在小麥生產(chǎn)中存在的重要問題,。由于穗發(fā)芽影響,世界小麥的產(chǎn)量年損失近1億噸,。我國黃淮麥區(qū)因成熟期遇雨也多次發(fā)生大面積小麥穗發(fā)芽,,進而造成斷種和面粉不能食用的災情;在北方麥區(qū),,雖然沒有梅雨季節(jié),,但個別年份也曾出現(xiàn)過麥收期連續(xù)陰雨導致小麥穗發(fā)芽的情況。由于穗發(fā)芽會導致小麥種子內部一系列的生理生化變化,,蛋白質,、淀粉等貯藏物質分解,,從而造成籽粒產(chǎn)量,特別是面粉的營養(yǎng)品質和加工品質下降,,小麥失去種用價值,,將給小麥生產(chǎn)造成嚴重的經(jīng)濟損失。因此,,小麥穗發(fā)芽是長期以來國內外小麥育種專家和生理學家廣泛關注的問題,。目前生產(chǎn)上所使用的大多數(shù)小麥栽培品種,均存在一定的穗發(fā)芽,。
河南農(nóng)業(yè)大學國家小麥工程技術研究中心副主任尹鈞介紹,,國內外有關硫氧還蛋白?Trx,?生物學功能和反義基因作用機理的研究為創(chuàng)育抗穗發(fā)芽小麥資源提供了一條新途徑,。Trx是一種能催化二硫鍵氧化還原反應的功能蛋白,它能改變種子中淀粉酶和蛋白質酶等重要酶的活性,,增加貯藏蛋白的水溶性和促進營養(yǎng)物質水解的作用,,對作物種子萌發(fā)過程中營養(yǎng)物質的供應有重要的調節(jié)作用。源于藍色黑鴨草的trxs基因與Trx基因同屬于硫氧還蛋白基因家族,,其蛋白質表達產(chǎn)物有相似的生物活性,。將反義trxs基因導入小麥有望降低種子中Trx的活性,抑制淀粉酶和蛋白質酶的活性,,減慢種子發(fā)芽時的淀粉,、蛋白質的水解和碳氮代謝,最終導致轉基因小麥子粒發(fā)芽能力減弱,。
該課題組從1997年開始進行反義trxs基因導入小麥的研究,,在國家“863”項目、國家轉基因植物與產(chǎn)業(yè)化研究專項和河南省杰出人才創(chuàng)新基金等項目的資助下,,研究采用基因槍轉化技術,對黃淮麥區(qū)十多個推廣品種,、數(shù)萬個幼胚進行了遺傳轉化,,通過幼胚愈傷組織的誘導、篩選與植株再生培養(yǎng),,獲得了轉基因再生植株,,經(jīng)對轉基因小麥后代株系的追蹤分子檢測和純合系篩選,目前已得到了目的基因在小麥基因組中遺傳穩(wěn)定的轉基因第四代小麥,。通過對目的基因的分子檢測,,確定了目的基因在小麥基因組中的遺傳穩(wěn)定情況;通過對轉基因小麥籽粒和胚乳的生化生理特性測定,,證明了目的基因在轉基因小麥部分株系中能夠正常表達,;通過對轉基因穩(wěn)定遺傳和表達的株系進行模擬降雨抗穗發(fā)芽試驗,,證實部分轉基因株系與對照組相比,具有很強的抗穗發(fā)芽能力,。
據(jù)尹鈞介紹,,他們根據(jù)轉基因在基因組中的整合情況、分子檢測結果和轉基因小麥子粒生理生化變化,,與轉基因株系在抗穗發(fā)芽試驗中的表現(xiàn),,已經(jīng)獲得了4個具有抗穗發(fā)芽能力的轉基因純合株系,并且研究結果顯示外源反義trxs基因已經(jīng)整合到小麥基因組中,,并能穩(wěn)定遺傳,,外源反義trxs基因的導入與表達,直接干擾了小麥自身Trx基因的表達,,導致轉基因小麥子粒中硫氧還蛋白水平下降,。
通過抑制小麥自身硫氧還蛋白的活性,抑制了高等電點淀粉酶同工酶活性,,降低了儲藏蛋白質自由巰基的水平與可溶性,,影響了子粒儲藏物質的水解動員與正常的碳氮代謝。因此,,子粒發(fā)芽所需營養(yǎng)不能得到有效供應是轉基因小麥具備抗發(fā)芽能力的主要原因,。