生成過氧化氫以及單質(zhì)氧,,一種重要的抗氧化酶。哺乳動物細(xì)胞溶質(zhì)中的SOD呈綠色,,并且由兩種亞單位構(gòu)成,,一種含有銅,另一種含有鋅(Cu/Zn-SOD線粒體和細(xì)菌SOD為紅紫色并含有錳(Mn-SODE.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD
超氧化物歧化酶(SOD能夠催化超氧陰離子(O2?-歧化,。
為了測定SOD活性,,研究人員嘗試了許多間接的或者直接的方法,其中,,NBT間接法最為常用,,因?yàn)樗芊奖?。但是NBT法有幾個缺點(diǎn),,例如生成的染料水溶性差,,而且會和黃嘌呤氧化酶的還原型發(fā)生反應(yīng)。雖然cytochromC法也常被用來做SOD檢測,,但它和超氧化物反應(yīng)過于劇烈,,不能測定低水平的SODSODAssaiKit-WST®使用了Dojindo自己發(fā)明的易溶于水的噻唑鹽:WST®-12-4-碘苯基)-3-4-硝基苯基)-5-2,4-二磺酸苯基)-2氫-四唑鹽,二鈉鹽)能夠和超氧陰離子反應(yīng)生成水溶性的染料,因此可以簡便地進(jìn)行SOD檢測,。WST®-1與超氧陰離子反應(yīng)的劇烈水平比cytochromC小70倍,;因此,檢測靈敏度非常高,,并且能夠通過將樣品用buffer稀釋,,使背景的吸光度最小化。WST®-1不會和黃嘌呤氧化酶的還原型發(fā)生反應(yīng),,因此,,能夠檢測SOD100%抑制率。WST®-1被超氧陰離子還原的比率與黃嘌呤氧化酶的活性線性相關(guān),,并且會被SOD所抑制(見下圖)因此,,SOD或者SOD類似物的IC5050%抑制濃度)就能用比色法來測定。
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