操作步驟
1.首先將內(nèi)層滅菌桶取出,,再向外層鍋內(nèi)加入適量的水,,使水面與三角擱架相平為宜。
2.放回滅菌桶,,并裝入待滅菌物品,。注意不要裝得太擠,以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果,。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸,,以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。
3.加蓋,,并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi),。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓,使螺栓松緊一致,,勿使漏氣,。
4.用電爐或煤氣加熱,并同時打開排氣閥,,使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣,。待冷空氣完全排盡后,關上排氣閥,,讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升,。當鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時,控制熱源,,維持壓力至所需時間,。本實驗用 1.05kg/cm2,121.3℃,,20分鐘滅菌,。
5.滅菌所需時間到后,切斷電源或關閉煤氣,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,,當壓力表的壓力降至0時,,打開排氣閥,旋松螺栓,,打開蓋子,,取出滅菌物品。如果壓力未降到0時,,打開排氣閥,,就會因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染,。
6.將取出的滅菌培養(yǎng)基放入 37℃溫箱培養(yǎng)24小時,經(jīng)檢查若無雜菌生長,,即可待用,。