高壓蒸氣滅菌法是一種迅速而有效的滅菌方法。使用高壓蒸氣滅菌器,，利用加熱產(chǎn)生蒸氣,，隨著蒸氣壓力不斷增加，溫度隨之升高,，通常壓力在103.4kPa(相當(dāng)舊制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )時(shí),，器內(nèi)溫度可達(dá)121.3℃，維持15～30min,，可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物,。此法常用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水,、手術(shù)器械及敷料等耐濕和耐高溫物品的滅菌,。
高壓蒸汽滅菌法的注意事項(xiàng)：
第一，無(wú)菌包不宜過(guò)大（小于50cm×30cm×30cm）,，不宜過(guò)緊,，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對(duì)流易滲透到包裹中央,。消毒前,，打開(kāi)貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通,。而且排氣時(shí)使蒸汽能迅速排出,，以保持物品干燥。消毒滅菌完畢,，關(guān)閉貯槽或盒的通氣孔,，以保持物品的無(wú)菌狀態(tài)。
第二,，布類(lèi)物品應(yīng)放在金屬類(lèi)物品上,，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮,。阻礙蒸汽進(jìn)入包裹中央,，嚴(yán)重影響滅菌效果。
第三,，定期檢查滅菌效果,。經(jīng)高壓蒸汽滅菌的無(wú)菌包、無(wú)菌容器有效期以1周為宜,。高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)：有以下三種方法,。
第一種是工藝監(jiān)測(cè)，又稱(chēng)程序監(jiān)測(cè),。根據(jù)安裝在滅菌器上的量器（壓力表,、溫度表,、計(jì)時(shí)表）、圖表,、指示針,、報(bào)警器等，指示滅菌設(shè)備工作正常與否,。此法能迅速指出滅菌器的故障,，但不能確定待滅菌物品是否達(dá)到滅菌要求。此法作為常規(guī)監(jiān)測(cè)方法,，每次滅菌均應(yīng)進(jìn)行,。
第二種是化學(xué)指示監(jiān)測(cè)。利用化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時(shí)間條件下受熱變色或變形的特點(diǎn),，以判斷是否達(dá)到滅菌所需參數(shù),。常用的有：
自制測(cè)溫管：將某些化學(xué)藥物的晶體密封于小玻璃管內(nèi)（長(zhǎng)2cm,內(nèi)徑1～2mm）制成。常用試劑有苯甲酸（熔點(diǎn)121－123℃）等,。滅菌時(shí)，當(dāng)濕度上升至藥物的熔點(diǎn),，管內(nèi)的晶體即熔化,，事后，雖冷卻再凝固,，其外形仍可與未熔化的晶體相區(qū)別,，此法只能指示溫度，不能指示熱持續(xù)時(shí)間是否已達(dá)標(biāo),，因此是最低標(biāo)準(zhǔn),。主要用于各物品包裝的中心情況的監(jiān)測(cè)。
3M壓力滅菌指示膠帶：此膠帶上印有斜形白色指示線條圖案,，是一種貼在待滅菌的無(wú)菌包外的特制變色膠紙,。其粘貼面可牢固地封閉敷料包、金屬盒或玻璃物品,，在121℃經(jīng)20分鐘,，130℃經(jīng)4分鐘后，膠帶100％變色（條紋圖案即顯現(xiàn)黑色斜條）,。3M膠帶既可用于物品包裝表面情況的監(jiān)測(cè),，又可用于對(duì)包裝中心情況的監(jiān)測(cè)，還可以代替別針,，夾子或帶子使用,。
第三種是生物指示劑監(jiān)測(cè)。利用耐熱的非致病性細(xì)菌芽胞作指示菌,，以測(cè)定熱力滅菌的效果,。菌種用嗜熱脂肪桿菌,，本菌芽胞對(duì)熱的抗力較強(qiáng)，其熱死亡時(shí)間與病原微生物中抗力最強(qiáng)的肉毒桿菌芽胞相似,。生物指示劑有芽胞懸液,、芽胞菌片以及菌片與培養(yǎng)基混裝的指示管。檢測(cè)時(shí)應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包,，每個(gè)包中心部位置生物指示劑2個(gè),，放在滅菌柜室的5個(gè)點(diǎn)，即上,、中層的中央各一個(gè)點(diǎn),，下層的前、中,、后各一個(gè)點(diǎn),。滅菌后，取出生物指示劑,，接種于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中,，置55－60℃溫箱中培養(yǎng)48小時(shí)至7天，觀察最終結(jié)果,。若培養(yǎng)后顏色未變,，澄清透明，說(shuō)明芽胞已被殺滅,。達(dá)到了滅菌要求,。若變?yōu)辄S色混濁，說(shuō)芽胞未被殺滅,，滅菌失敗
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