微量移液器的校準方法有哪些？愛寶醫(yī)療移液器：
定量移液器的校準——稱量法
校準應(yīng)在無通風的房間,，移液器和空氣溫度在20℃-25℃之間，相對濕度必需在55％以上,。特別是當移液量在50ul以下其空氣濕度應(yīng)越高越好以減少蒸發(fā)損失的影響,。
在萬分之一級別天平上放置一個小三角燒瓶，用待標定的移液器吸取蒸餾水（隔夜存放）加入小三角燒瓶內(nèi)底部,，每次稱重后計量,，去皮重后再加蒸餾水，連續(xù)加蒸餾水 10次,。加蒸餾水的量根據(jù)待標定的移液器不同規(guī)格而不同,，見下表。移液器10次標定稱量在所要求的重量范圍之內(nèi)為合格移液器,；不合格移液器需要進行調(diào)整,。移液器標定合格后,，填寫自校記錄。
移液器規(guī)格 標定使用蒸餾水量 要求重量范圍
0.5-10ul 2ul 1.75-2.25mg
5-40ul 10ul 9.8-10.2mg
40-200ul 70ul 69.4-70.6mg
200-1000ul 300ul 298.0-302.0mg
1- 5ml 2000ul 1990.0-2010.0mg
2- 10ml 3500ul 3485.0-3515.0mg
一,、實驗室簡單檢測
（一） 氣密性檢測
移液器吸滿液體后，手持垂直放置15s,，檢查吸嘴的尖頭有無液滴,，如有，則說明漏氣,。
（二） 準確性檢測
1) 量程小于1μl,，建議使用分光光度法檢測。將移液器調(diào)至目標體積,，然后移取染料溶液,，加入一定體積的蒸餾水中，測定溶液的稀釋度（334nm或340nm）,，重復(fù)幾次移液操作,，計算移液器的精確度。
2) 量程大于1μl,，可以用稱重法檢測,。通過對水的稱重，轉(zhuǎn)換成體積（體積=質(zhì)量/密度）,，鑒別移液器的準確性,。由于水的密度是隨著溫度變化而變化，且稱量天平本身精確度不符合檢測要求,，檢測又大多在一個開放式空間內(nèi)操作,，偏差在所難免。因而,，此種稱量法只能現(xiàn)場粗略地判斷移液器的準確性,，進一步的校準必須在專業(yè)的實驗室操作進行。
注意：稱重法實驗室必備條件是高度靈敏的分析天平（定期校準）,、雙蒸水和稱量容器,。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度（20℃時水的密度為0.09982）,。
二,、專業(yè)校準
移液器的工作量大，長期使用,，將會使彈簧彈力發(fā)生變形,，加之本身是塑料，不耐磨擦,，就會產(chǎn)生誤差,。為了保證移液器傳遞液體量的準確性,，必須對移液器進行定期校準。為了更好地發(fā)揮該類計量儀器的作用,，對新購進的儀器要進行校準才能使用,；對正在使用的計量儀器，由于長期使用會造成其示值于度量對象的誤差,，這種誤差若不進行控制,，及時校正，必定會影響科研工作,。因此,，對使用的移液器要定期檢定、校正,，并建立檔案,，只有這樣才能使其在日常工作中更好的發(fā)揮作用。
目前,，在許多實驗室條件下進行的常規(guī)檢測并不能完全取代專業(yè)的校準工作,，因為校準對于外部環(huán)境、工作條件及使用的精密儀器具有較高的技術(shù)要求,，而這些條件往往是大多數(shù)實驗室無法提供的?，F(xiàn)在一些大型的移液器制造商均采用全球統(tǒng)一的移液器標準操作規(guī)范，利用專業(yè)軟件校正系統(tǒng),，通過計算機對分析天平進行在線控制,，測量、數(shù)據(jù)采集,、計算,、結(jié)果評價等環(huán)節(jié)由軟件控制完成，所有人為操作都被計算機記錄隨報告打印出來,，采用電腦對數(shù)據(jù)進行評估認證,，完全排除了人為操縱校準結(jié)果的可能性，并制定當?shù)卮砩烫峁I(yè)的校準和維修服務(wù),。下面以eppendorf移液器公司為例，介紹其專業(yè)校準操作,。
（一） 校準的基本操作條件
操作室：獨立房間,，顯示溫度和濕度狀態(tài)。
溫度控制：15~30℃（±0.5℃）
濕度控制：60%~90%
工作臺面：防震,、防塵,、遠離熱源、無陽光直射,。
天平：0.000 01g精密分析天平（小數(shù)點后5位）,，每年需由廠家進行校準,。
防蒸發(fā)裝置：Eppendorf提供的濕度阱，防止稱量液體的揮發(fā),。
測試介質(zhì)：雙蒸水,，每4h更換一次，批次更換周期不大于2周,。
（二） 操作過程
1） 同溫化處理：校正前,，所有移液器及校正介質(zhì)（如工作臺、天平,、雙蒸水等）置于相同操作間至少4h,，以確保它們具有相同的溫度。
2） 內(nèi)外部清洗,。
3） 潤滑活塞,。
4） 校準：采用三點校準法，即根據(jù)移液器量程范圍,，選取最低量程,、中間值和最高量程三點分別測試10次，各個測試點取其平均值,，計算其準確度（inaccuracy）和精確度（imprecision）,，評價標準符合DIN 12650要求。
5） 校準報告：可根據(jù)客戶需求提供給算計打印的標準報告或PICASO校正報告,，符合ISO,、DIN或ASTM相關(guān)標準。
三,、影響準確性的因素
1） 操作錯誤：包括30℃手持式移液器吸液,；與吸嘴不匹配，較易造成脫落,；殘留的試劑倒流,，污染活塞和密封圈；快速吸液排液,，導(dǎo)致部分液體殘留在吸頭上等都會影響準確性,。
2） 移液器損壞：包括移液器的頭部被刮擦，斷裂受損,；活塞受污染,；彈簧受腐蝕等。
3） 操作條件的影響：包括未作調(diào)整吸取與水不同密度的液體,；樣品和移液器的差別太大等,。
