微量移液器的校準方法有哪些？愛寶醫(yī)療移液器：
定量移液器的校準——稱量法
校準應在無通風的房間,，移液器和空氣溫度在20℃-25℃之間,，相對濕度必需在55％以上,。特別是當移液量在50ul以下其空氣濕度應越高越好以減少蒸發(fā)損失的影響。
在萬分之一級別天平上放置一個小三角燒瓶,，用待標定的移液器吸取蒸餾水（隔夜存放）加入小三角燒瓶內(nèi)底部,，每次稱重后計量，去皮重后再加蒸餾水,，連續(xù)加蒸餾水 10次,。加蒸餾水的量根據(jù)待標定的移液器不同規(guī)格而不同，見下表,。移液器10次標定稱量在所要求的重量范圍之內(nèi)為合格移液器,；不合格移液器需要進行調整。移液器標定合格后,，填寫自校記錄,。
移液器規(guī)格 標定使用蒸餾水量 要求重量范圍
0.5-10ul 2ul 1.75-2.25mg
5-40ul 10ul 9.8-10.2mg
40-200ul 70ul 69.4-70.6mg
200-1000ul 300ul 298.0-302.0mg
1- 5ml 2000ul 1990.0-2010.0mg
2- 10ml 3500ul 3485.0-3515.0mg
一、實驗室簡單檢測
（一） 氣密性檢測
移液器吸滿液體后,，手持垂直放置15s,，檢查吸嘴的尖頭有無液滴，如有,，則說明漏氣,。
（二） 準確性檢測
1) 量程小于1μl，建議使用分光光度法檢測,。將移液器調至目標體積,，然后移取染料溶液，加入一定體積的蒸餾水中,，測定溶液的稀釋度（334nm或340nm）,，重復幾次移液操作，計算移液器的精確度,。
2) 量程大于1μl,，可以用稱重法檢測。通過對水的稱重,，轉換成體積（體積=質量/密度）,，鑒別移液器的準確性。由于水的密度是隨著溫度變化而變化,，且稱量天平本身精確度不符合檢測要求,，檢測又大多在一個開放式空間內(nèi)操作，偏差在所難免,。因而,，此種稱量法只能現(xiàn)場粗略地判斷移液器的準確性，進一步的校準必須在專業(yè)的實驗室操作進行,。
注意：稱重法實驗室必備條件是高度靈敏的分析天平（定期校準）,、雙蒸水和稱量容器,。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度（20℃時水的密度為0.09982）,。
二,、專業(yè)校準
移液器的工作量大，長期使用,，將會使彈簧彈力發(fā)生變形，加之本身是塑料,，不耐磨擦,，就會產(chǎn)生誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準確性,，必須對移液器進行定期校準,。為了更好地發(fā)揮該類計量儀器的作用，對新購進的儀器要進行校準才能使用,；對正在使用的計量儀器,，由于長期使用會造成其示值于度量對象的誤差，這種誤差若不進行控制,，及時校正,，必定會影響科研工作。因此,，對使用的移液器要定期檢定,、校正，并建立檔案,，只有這樣才能使其在日常工作中更好的發(fā)揮作用,。
目前，在許多實驗室條件下進行的常規(guī)檢測并不能完全取代專業(yè)的校準工作,，因為校準對于外部環(huán)境,、工作條件及使用的精密儀器具有較高的技術要求，而這些條件往往是大多數(shù)實驗室無法提供的?，F(xiàn)在一些大型的移液器制造商均采用全球統(tǒng)一的移液器標準操作規(guī)范,，利用專業(yè)軟件校正系統(tǒng)，通過計算機對分析天平進行在線控制,，測量,、數(shù)據(jù)采集、計算,、結果評價等環(huán)節(jié)由軟件控制完成,，所有人為操作都被計算機記錄隨報告打印出來，采用電腦對數(shù)據(jù)進行評估認證,，完全排除了人為操縱校準結果的可能性,，并制定當?shù)卮砩烫峁I(yè)的校準和維修服務,。下面以eppendorf移液器公司為例，介紹其專業(yè)校準操作,。
（一） 校準的基本操作條件
操作室：獨立房間,，顯示溫度和濕度狀態(tài)。
溫度控制：15~30℃（±0.5℃）
濕度控制：60%~90%
工作臺面：防震,、防塵,、遠離熱源、無陽光直射,。
天平：0.000 01g精密分析天平（小數(shù)點后5位）,，每年需由廠家進行校準。
防蒸發(fā)裝置：Eppendorf提供的濕度阱,，防止稱量液體的揮發(fā),。
測試介質：雙蒸水，每4h更換一次,，批次更換周期不大于2周,。
（二） 操作過程
1） 同溫化處理：校正前，所有移液器及校正介質（如工作臺,、天平,、雙蒸水等）置于相同操作間至少4h，以確保它們具有相同的溫度,。
2） 內(nèi)外部清洗,。
3） 潤滑活塞。
4） 校準：采用三點校準法,，即根據(jù)移液器量程范圍,，選取最低量程、中間值和最高量程三點分別測試10次,，各個測試點取其平均值,，計算其準確度（inaccuracy）和精確度（imprecision），評價標準符合DIN 12650要求,。
5） 校準報告：可根據(jù)客戶需求提供給算計打印的標準報告或PICASO校正報告,，符合ISO、DIN或ASTM相關標準,。
三,、影響準確性的因素
1） 操作錯誤：包括30℃手持式移液器吸液；與吸嘴不匹配,，較易造成脫落,；殘留的試劑倒流，污染活塞和密封圈,；快速吸液排液,，導致部分液體殘留在吸頭上等都會影響準確性,。
2） 移液器損壞：包括移液器的頭部被刮擦，斷裂受損,；活塞受污染,；彈簧受腐蝕等。
3） 操作條件的影響：包括未作調整吸取與水不同密度的液體,；樣品和移液器的差別太大等,。
