1.避免技術(shù)誤差,,糾正儀器誤差
(1)所用器材均應(yīng)清潔干燥,計(jì)數(shù)板,、血蓋片、微量吸管及刻度吸管的規(guī)格應(yīng)符合要求或經(jīng)過校正,。①計(jì)數(shù)板的鑒定:要求計(jì)數(shù)室的臺面光滑,、透明,劃線清晰,,計(jì)數(shù)室劃線面積準(zhǔn)確,。必要時(shí)采用嚴(yán)格校正的目鏡測微計(jì)測量計(jì)數(shù)室的邊長與底面積,用微米千分尺測量計(jì)數(shù)室的深度,。美國國家標(biāo)準(zhǔn)局(NBS)規(guī)定每個大方格邊長的誤差應(yīng)小于1%,,即1±0.01mm,深度誤差應(yīng)小于2%,,即0.1±0.002mm,。若超過上述標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)棄之不用,。②血蓋片應(yīng)具有一定的重量,,平整、光滑,、無裂痕,,厚薄均勻一致,,可使用卡尺多點(diǎn)測量(至少在9個點(diǎn)),不均勻度在0.002mm之內(nèi),。必要時(shí)采用平面平行儀進(jìn)行測量與評價(jià),,要求呈現(xiàn)密集平行的直線干涉條紋。最簡單的評價(jià)方法是將潔凈的蓋片緊貼于干燥的平面玻璃上,,若能吸附一定的時(shí)間不脫落,,落下時(shí)呈弧線形旋轉(zhuǎn),表示蓋片平整,、厚薄均勻,。同時(shí),合格的蓋片放置在計(jì)數(shù)室表面后,,與支持柱緊密接觸的部位可見到彩虹,。精選出的蓋片與其他蓋片緊密重合后,在掠射光線下觀察,,如見到完整平行的彩虹條紋表示另一枚蓋片質(zhì)量也符合要求,。③目前臨床實(shí)驗(yàn)室多采用一次性微量采血管采集毛細(xì)血管血,除注意定點(diǎn)購買使用信譽(yù)較好廠家的產(chǎn)品外,,還應(yīng)對每一批量的采血管進(jìn)行抽樣檢查,,可通過水銀稱重法或有色溶液比色法進(jìn)行校正,誤差不應(yīng)超過±1%,。
(2)細(xì)胞稀釋液應(yīng)新鮮,、無雜質(zhì)微粒。
(3)嚴(yán)格操作,,從消毒,、采血、稀釋,、充池到計(jì)數(shù)都應(yīng)規(guī)范,,尤其應(yīng)注意的是血樣稀釋及充池時(shí)既要作到充分混勻,又要防止劇烈震蕩為破壞紅細(xì)胞,。必須一次性充滿計(jì)數(shù)室,,防止產(chǎn)生氣泡,充入細(xì)胞懸液的量以不超過計(jì)數(shù)室臺面與血蓋片之間的矩形邊緣為宜,。
(4)報(bào)告法定計(jì)量單位,。
2.縮小計(jì)數(shù)域誤差或分布誤差 由于血細(xì)胞在充入計(jì)數(shù)室后呈隨機(jī)分布或稱Poisson分布( ),而我們所能計(jì)數(shù)的細(xì)胞分布范圍是有限的,,由此造成的計(jì)數(shù)誤差稱為計(jì)數(shù)域誤差或分布誤差,。縮小這種誤差的有效方法就是盡量擴(kuò)大細(xì)胞計(jì)數(shù)范圍和計(jì)數(shù)數(shù)目,,一般先進(jìn)行誤差估計(jì),,然后決定所需計(jì)數(shù)的數(shù)目和計(jì)數(shù)范圍,,只要能將誤差控制在允許范圍內(nèi)即可。Berkson指出,,當(dāng)使用同一支吸管,、同一面計(jì)數(shù)室,計(jì)數(shù)0.2mm2面積的細(xì)胞數(shù),,有望將 CV控制在可接受的7%以內(nèi),。對于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)而言,由于紅細(xì)胞數(shù)量較多,,在計(jì)數(shù)室中顯得比較“擁擠”,,根據(jù)Poisson公式( )推斷, ,。欲將誤差控制在變異百分?jǐn)?shù)5%以內(nèi),,至少需要在計(jì)數(shù)室中計(jì)數(shù)400個紅細(xì)胞,因此要求計(jì)數(shù)五個中方格的紅細(xì)胞,。事實(shí)上Berkson還通過實(shí)驗(yàn)證明,,紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)域誤差為s=0.92 ,較理論誤差(Poisson分布誤差)要小,。
血球分類計(jì)數(shù)板 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 血細(xì)胞分類計(jì)數(shù)板 紅血球計(jì)數(shù)板 白血球計(jì)數(shù)板 牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板 血細(xì)胞分類計(jì)數(shù)器
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