1  血球計數(shù)板

視待測菌懸液濃度,，加無菌水適當(dāng)稀釋（斜面一般稀釋100倍），以每小格的菌數(shù)可數(shù)為度,。

2．取潔凈的血球計數(shù)板一塊,，在計數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。 

3．將菌懸液搖勻,，用滴管吸取少許,，從計數(shù)板中間平臺兩側(cè)的溝槽內(nèi)沿蓋玻片的下邊緣摘入一小滴（不宜過多），讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數(shù)區(qū),，勿使氣泡產(chǎn)生,，并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計數(shù)區(qū)上（不要使計數(shù)區(qū)兩邊平臺沾上菌懸液,，以免加蓋蓋玻片后,，造成計數(shù)區(qū)深度的升高），然后加蓋蓋玻片（勿使產(chǎn)生氣泡）。

4．靜置片刻,，使細(xì)胞沉降到計數(shù)板上,，不再隨液體漂移。將血球計數(shù)板放置于顯微鏡的載物臺上夾穩(wěn),，先在低倍鏡下找到計數(shù)區(qū)后,，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察并計數(shù)。由于生活細(xì)胞的折光率和水的折光率相近,，觀察時應(yīng)減弱光照的強(qiáng)度,。 　　

5．計數(shù)時若計數(shù)區(qū)是由16個大方格組成，按對角線方位,，數(shù)左上,、左下、右上,、右下的4個大方格（即100小格）的菌數(shù),。如果是25個大方格組成的計數(shù)區(qū)，除數(shù)上述四個大方格外,，還需數(shù)中央1個大方格的血球計數(shù)板,。菌數(shù)（即80個小格）。為了保證計數(shù)的準(zhǔn)確性,，避免重復(fù)計數(shù)和漏記,，在計數(shù)時，對沉降在格線上的細(xì)胞的統(tǒng)計應(yīng)有統(tǒng)一的規(guī)定,。如菌體位于大方格的雙線上,，計數(shù)時則數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線,，以減少誤差,。即位于本格上線和左線上的細(xì)胞計入本格，本格的下線和右線上的細(xì)胞按規(guī)定計入相應(yīng)的格中,。見右圖：即本格中計數(shù)細(xì)胞為3個,。

6．對于出芽的酵母菌，芽體達(dá)到母細(xì)胞大小一半時,，即可作為兩個菌體計算,。每個樣品重復(fù)計數(shù)2-3次（每次數(shù)值不應(yīng)相差過大，否則應(yīng)重新操作）,，按公式計算出每mL（g）菌懸液所含細(xì)胞數(shù)量,。 　　

7．測數(shù)完畢，取下蓋玻片,，用水將血球計數(shù)板沖洗干凈,，切勿用硬物洗刷或抹擦,，以免損壞網(wǎng)格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干,，放入盒內(nèi)保存,。

材質(zhì)：載玻片是在實(shí)驗(yàn)時用來放置實(shí)驗(yàn)材料的玻璃片，呈長方形,，較厚,，透光性較好；蓋玻片是蓋在材料上,，避免液體和物鏡相接觸,，以免污染物鏡，呈正方形,，較薄,，透光性較好。

 

紅細(xì)胞計數(shù)公式：

紅細(xì)胞數(shù)/L=N*25/5*10*10^6*200 　　

N為：五個中方格的RBC總數(shù) 　　

N*25/5為：中央大方格RBC總數(shù)（即：0.1mm（ul）的RBC總數(shù)） 　　

N*25/5*10為：1mm（ul）RBC總數(shù) 　

N*25/5*10*10^6為：1L的RBC總數(shù) 　　

*200為血液的稀釋倍數(shù) 　　

公式簡化后：紅細(xì)胞數(shù)/L=N/100*10^12

作用：載玻片是用顯微鏡觀察東西詩用來放東西的玻璃片,，然后將蓋玻片放置其上,，用作觀察生物。

 

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