血球計數(shù)板是用以計算人體內(nèi)紅、白血球數(shù)量之用,,因人體內(nèi)某些正?;顒忧闆r發(fā)生變化時,常能使體內(nèi)血液中紅,、白血球在量和質(zhì)的方面,,也有某些程度的變化,這些變化通過血球計數(shù)板,,在生物顯微鏡的放大下檢驗紅,、白血球的多少和變化的情況,將結(jié)果提供給臨床醫(yī)師,,作疾病的診斷和治療過程中的重要參考,。
利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細胞計數(shù)法,這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數(shù)目,,所以一般用于單細胞微生物數(shù)量的測定,,由于血球計數(shù)板上的計數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的,所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細胞數(shù)目來計算單位體積的細胞的總數(shù)目,。利用血球計數(shù)板進行計數(shù),,也可適用于酵母菌和霉菌孢子的數(shù)量測定。若要測定細菌數(shù)量時誤差較大,。本法測得的是菌體(細胞)總數(shù),、不能區(qū)分是活菌體(活細胞)還是死菌(死細胞)。
血細胞計數(shù)板的構(gòu)造和使用:
血球計數(shù)板,,通常是一塊特制的載玻片,,載玻片上有4條槽而構(gòu)成3個平臺。中間的平臺較寬,,其中間又被一短橫槽分隔成兩半,,每個半邊上面各有一個計數(shù)區(qū)(圖c中間),計數(shù)區(qū)被分成9個大方格【圖c】,。中間的大方格為計數(shù)室,。
計數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格:一種是計數(shù)室(一個大方格)【圖c】(16×25)分為16個中方格,而每個中方格又分成25個小方格,;另一種是一個計數(shù)室(一個大方格)【圖d】(25×16)分成25個中方格,,而每個中方格又分成16個小方格,。但無論是哪種規(guī)格的計數(shù)板,每一個大方格中的小方格數(shù)都是相同的,,即計數(shù)室都由400(16×25=400)個小方格組成,。
每個計數(shù)室邊長為1mm(有的是2mm),則計數(shù)室的面積為1mm2(4mm2),。蓋上蓋玻片后,,計數(shù)室的高度為0.1mm,所以每個計數(shù)室的體積為0.1mm3[10-4mL](0.4 mm3),。
使用血球計數(shù)板計數(shù)時,,先要測定計數(shù)室中5個中方格[如圖所示]中微生物的數(shù)量,再換算成每毫升菌液微生物細胞的數(shù)量,。
已知:0.1mm3體積=10-4mL [即1mL=10000 mm3,,1個大方格(計數(shù)室)為1mm3]
下面【圖c】為16(中格)×25(小格)的血球板。
每mL菌懸液中含有細胞數(shù)=計數(shù)室5個中格的菌數(shù)之和/5 ×16×10000×菌液稀釋倍數(shù),。
下面【圖d】為25(中格)×16(小格)的血球板,。
每mL菌懸液中含有細胞數(shù)= 計數(shù)室5個中格的菌數(shù)之和/5 ×25×10000×菌液稀釋倍數(shù)。
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