同濟醫(yī)大 Zhou Jie（周潔）綜述
摘要 CD4+CD25+T細胞是CD4+調節(jié)性T細胞的一個亞群,，在誘導自身耐受,、維持T細胞自穩(wěn)、防止自身免疫病以及抗移植排斥中都起著重要作用,。其作用機制可能通過細胞間直接接觸和/或抑制性細胞因子?，F(xiàn)在已證實在人體內存在這種細胞。
關鍵詞 CD4+CD25+T細胞 免疫耐受 移植排斥
經典的免疫學理論認為,，免疫系統(tǒng)的一個重要功能是識別"自我"和"非我",，因而成熟的淋巴細胞可以識別外來抗原并與之反應，但并不與自身抗原反應,。這對于抵抗外來侵略以及維持自身內環(huán)境穩(wěn)定,，都有著極為重要的意義。建立這種識別功能的基本機制,，就在于淋巴細胞在胸腺中的發(fā)育,。
盡管胸腺的陰性選擇克隆清除了自身反應性T細胞，并建立了機體的自身耐受,，然而仍然有一部分自身反應性T細胞逃脫了這一過程,，并與機體的某些保護性機制建立了一個微妙的平衡,，從而形成自身耐受（self-tolerance）。最初觀點認為,，這些機制主要包括T細胞無能以及T細胞忽視,。然而，這些引發(fā)耐受的被動性機制并不完全充足,，直到CD4+CD25+T細胞的發(fā)現(xiàn),。
1. CD4+CD25+ T細胞概述
早在上個世紀60年代末70年代初，就有實驗證明調節(jié)性（或稱抑制性）T細胞在阻止器官特異性自身免疫反應中有著非常重要的作用(1),。在這些實驗中,，3天大的小鼠胸腺切除術(d3Tx)后產生器官特異性自身免疫疾病,而且每只小鼠不止一個器官患病。更為重要的是,，1天和7天大的小鼠胸腺切除術后,，不會患自身免疫疾病。而3天大的小鼠胸切除術后在它成長到10至15天,，給予胸腺移植,，便會完全抑止自身免疫病。這些實驗提出了如下假設,，即小鼠自身反應性T細胞出生3天內從胸腺中產生,，而幾天后，胸腺中又產生了一群抑止性細胞(suppressor T-cell)來調控自身反應性T細胞,。
盡管這些理論給自身免疫的產生提供了一個新的理論依據(jù),，然而人們并未找到得以將抑止性T細胞與其他T細胞區(qū)分開來的細胞表面標志，直到Sakaguchi等發(fā)現(xiàn)在普通的成鼠中將近10％的外周CD4+T細胞表達IL－2受體分子,，即CD25分子,，而這些細胞與小鼠的免疫耐受有關，他們稱之為天然調節(jié)性T細胞(natural regulatory T cells),。在實驗中,，他們預處理裸鼠CD4+T細胞，并使其不表達CD25分子,，然后將這種細胞接種于同系裸鼠,，結果所有受體鼠都發(fā)生了顯著的組織學和血清學自身免疫反應,，如甲狀腺炎,、腎上腺炎、胃炎等等,，有的小鼠甚至發(fā)生類似移植物抗宿主反應的消耗性疾病,。然而在一定時間內，給這群小鼠重新輸入CD4+CD25+T細胞,，則可以抑止這些自身免疫病的發(fā)生,。同時,，進行了同種異體皮膚移植或是給予異種蛋白免疫后的小鼠，接種了CD25+T細胞后,，顯示出對皮膚或蛋白的高免疫應答,，而重輸CD4+CD25+T細胞后，則使應答恢復正常,。這些實驗有效地證明了CD4+CD25+T細胞通過下調針對外來抗原或自身抗原的免疫應答水平,，來維持自身耐受。而這一過程,，都是非抗原特異性的(2),。
綜上所述，天然調節(jié)性T細胞為調節(jié)性T細胞中的一個獨特譜系,，細胞表型為CD4+CD25+,，出生后3天開始產生，在小鼠占外周CD4+T細胞的10%,，在人約占5-15%,具有天然的無能及抑止能力 (3),。在與CD4+CD25-T細胞的混合培養(yǎng)中，可以抑止后者的增殖,。它在誘導維持自身耐受,、維持T細胞自穩(wěn)、防止自身免疫疾病,、抗移植排斥以及甚至在加強對腫瘤的免疫應答中都起著重要作用(4-5),。
2.CD4+CD25+T細胞作用機制
關于CD4+CD25+T細胞的作用機制，尚存在很多爭議,，下面是主要的幾個觀點,。
有資料表明CD4+CD25+T細胞產生與調節(jié)相關的抑制性細胞因子如IL-10(6), TGF-?等。它們不產生IL-2,但是在體外或體內實驗中,，它們需要外源性IL-2來生長繁殖,。在體外對于超抗原的實驗研究中發(fā)現(xiàn)，它們抵抗克隆清除,，但是可以通過無能導致耐受,。另外，它們對于凋亡的敏感性以及抵抗性,，可能是它們導致耐受或產生致病性機制的根源(7),。
另有體外實驗表明CD4+CD25+T通過抑止效應細胞的IL－2的產生來抑止其增殖(8)。其機制可能與淋巴細胞的無能相關基因(GRAIL)上調有關,，而異常的無能相關基因可作為IL-2的負調節(jié)物(9),。
近來有研究發(fā)現(xiàn)，體內細胞的功能通過細胞表面表達的CTLA-4/CD152分子發(fā)送信號得以實現(xiàn)(10-11)。
還有觀點認為,，CD4+CD25+T細胞誘導和維持對于異種抗原的耐受是通過封閉協(xié)同刺激訊號CD40L/CD40或CD28(CTLA-4)/B7得以實現(xiàn)的(12),。
然而有其它資料表明(13)，在自身免疫疾病中,，天然調節(jié)性T細胞介導的保護機制不需要抑制性的細胞因子,，如IL-4，IL-10,或者TGF-?,。同時,，在體外實驗中，CD4+CD25+T細胞可以強烈抑制CD8+以及CD4+T細胞的活化,。這種抑制作用可能有賴于細胞間的直接接觸,，是非細胞因子依賴性的T-T細胞相互作用。CD4+CD25+T細胞通過它們的TCR活化產生抑制性效應器細胞,，而后者可以非特異性抑制CD4+或CD8+T細胞活化,。這些抑制效應功能活化不需要CD28/CTLA-4分子與CD80/CD86分子介導的協(xié)同刺激訊號。
因而,，天然調節(jié)性T細胞的許多具體作用機制仍然有待闡明,。
3.CD4＋CD25＋T細胞與移植
前面所說的自身反應性T細胞與機體保護性機制建立平衡，形成自身耐受,。然而當機體調控出現(xiàn)一點偏差,，自身耐受平衡被打破，就會導致自身免疫,。所以CD4+CD25+T細胞對自身免疫病,，腫瘤免疫以及移植耐受起著重要的作用。在這里,，主要談談它對移植耐受的影響,。
現(xiàn)在，我們主要通過T細胞特異性免疫抑止劑環(huán)孢素A,，或者使用單克隆抗體封閉CD4分子來建立移植耐受,。而這種耐受可以通過CD4+T細胞從耐受供體轉移到受體。
而CD4+CD25+T細胞在移植耐受中也起到重要作用(14),。例如,，從正常小鼠體內除去CD4+CD25+T細胞可以加強排斥，并降低移植物的存活(2),。相反的,，給予缺乏T細胞的移植術后小鼠接種同系CD4+CD25+T和處女T細胞，移植物存活時間明顯延長,。在體外MLR中,，異源刺激下，CD4+CD25+T細胞可以有效地抑制CD4+T細胞和CD8+T細胞的增殖性反應,。另外,，運用異源性刺激細胞以及高劑量的IL-2，在體外可以擴增異體抗原特異性CD4+CD25+T細胞(3),。
對于異體器官移植物,，可以在嚙齒類實驗動物中通過給予非清除性CD4以及CD8單克隆抗體治療，來誘導免疫耐受,。已有體外實驗克隆出針對人類移植物抗原的CD4+T細胞亞群(15),，結果表明，與Th1或Th2克隆引起耐受相反,，CD4+CD25+T細胞通過過繼性轉移(adoptive transfer)誘導耐受,。
另外，最新資料表明,，體外輸入活性擴增的CD4+CD25+T細胞可以抑制GVHD,，這對于骨髓移植有著重要意義(16)。
因此,，與調節(jié)自身反應性T細胞類似,，CD4+CD25+T細胞可以調控異源的反應性T細胞。而且,，加強CD4+CD25+T細胞介導的免疫調節(jié)可以建立異體移植物耐受,。然而，單克隆抗體和環(huán)孢素A誘導的移植物耐受過程是否也由CD4+CD25+T細胞決定還有待確定,。
5.小結與展望
現(xiàn)在已經在人類淋巴組織內找到CD4+CD25+T細胞,并且證實其功能與鼠類亞群極其相似,，并且提出天然調節(jié)性T細胞以未成熟形式離開胸腺，在外周獲得活性(17-19),。
越來越多的證據(jù)表明,，CD4+CD25+T細胞在人類體內對誘導和維持免疫耐受起著重要作用。深入研究CD4+CD25+T細胞,，可以幫助我們我們闡述耐受形成機制,，并為臨床移植耐受的誘導和建立提供更新更好的方案。
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