2006年3月14日,,由中國農(nóng)業(yè)科學院生物技術研究所主持完成,、由國家“863”計劃項目支持的“有機磷農(nóng)藥降解酶制劑的研制”項目成果通過了專家鑒定,。受農(nóng)業(yè)部科教司委托,,中國農(nóng)科院科技局袁學志副局長主持了鑒定會,,科技部生物技術發(fā)展中心王德平處長,,中國農(nóng)科院翟虎渠院長,、范云六院士以及我院生物技術所的領導和有意受讓該項成果的企業(yè)負責人等參加了鑒定會,。
由金鑒明院士等專家組成的鑒定委員會,認真聽取了課題主持人伍寧豐研究員的技術報告,,仔細審閱了相關技術資料,,一致認為:
1.該研究從被污染的土壤中篩選了一株能夠降解多種有機磷農(nóng)藥的細菌C2-1,經(jīng)鑒定為假產(chǎn)堿假單胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes),,分離純化了其分泌的有機磷降解酶OPHC2,,此酶具有優(yōu)良的酶學性質(zhì)。
2.從篩選到的有機磷降解菌中克隆了有機磷降解酶的編碼基因ophc2,,其核苷酸序列與已發(fā)表的同類基因相比最高同源性只有46.4%,,表明是一個新的有機磷降解酶基因,具有自主獨立知識產(chǎn)權,。此基因已申請國家發(fā)明專利,。
3.本研究在國際上首次成功地利用畢赤酵母(Pichia pastoris)來高效表達有機磷降解酶,可通過高細胞密度發(fā)酵低成本生產(chǎn)有機磷降解酶制劑。其優(yōu)勢在于:(1)高效表達,,有機磷降解酶的表達量達到6g/L,,酶活性為1.6 X 104U/mL發(fā)酵液,這是國內(nèi)外目前報道的有機磷降解酶最高的表達量,。(2)表達有機磷降解酶的重組畢赤酵母具有良好的安全性,,無抗藥性標記,培養(yǎng)過程中不分泌有毒物質(zhì)和熱源,。(3)利用分泌表達載體使有機磷降解酶成功分泌到胞外,,簡化了酶的后加工工藝,降低了成本,。上述工藝技術已申請國家發(fā)明專利,。
4.在中試水平上(3噸發(fā)酵罐)確立了利用基因工程酵母菌生產(chǎn)有機磷降解酶的穩(wěn)定的發(fā)酵工藝,其發(fā)酵方法簡單易行,,發(fā)酵原料易得,,技術指標優(yōu)越,產(chǎn)率高,,為下一步的有機磷降解酶的產(chǎn)業(yè)化奠定了基礎,。
5.重組畢赤酵母表達的有機磷降解酶具有良好的酶學性質(zhì),最適反應溫度為65℃,,最適反應pH為9.0,。有機磷降解酶的應用實驗表明,對多種有機磷農(nóng)藥制劑和軍用神經(jīng)毒劑均具有明顯的降解效果,,其中對甲基對硫磷和氧化樂果的降解率達到95%以上,,具有很好的應用潛力。
鑒定委員會專家一致認為,,該項目研究方法科學合理,、技術路線正確、資料齊全,、數(shù)據(jù)可信,,思路嚴謹清晰,實驗扎實細致,,成績出色顯著,,該成果居國際領先水平。這項擁有我國自主知識產(chǎn)權科研創(chuàng)新成果,,結合理論與實踐,結合前瞻性研究與解決國計民生問題,,并從解決食品安全延伸擴大到解決生態(tài)環(huán)境安全,,對我國食品安全和生態(tài)環(huán)境保護具有巨大的應用前景。
鑒定委員會專家建議有關部門盡快組織生產(chǎn)性試驗,政府要進一步予以政策和經(jīng)費支持,,企業(yè)宜從長遠目標出發(fā),,努力成為科技創(chuàng)新的主體,政府,、企業(yè)和科研單位一起共同努力,,加快產(chǎn)業(yè)化步伐,使科技成果迅速轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力,。
中國農(nóng)業(yè)科學院翟虎渠院長在講話中指出,,由于化學方法存在諸多弊端,解決環(huán)境污染的問題還要依靠生物技術,。該項研究成果為產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)和解決重大國計民生問題奠定了良好的基礎,。在范云六院士的帶領和指導下,課題組全體研究人員奮力拼搏,,通過酶制劑的成功研制在農(nóng)業(yè)應用微生物領域做出了重大貢獻,。
科技部生物技術發(fā)展中心王德平處長在發(fā)言中指出,生物技術研究周期長,,面臨的問題復雜,,受到的影響因素多,在大家的共同努力下,,該項研究能取得今天的成績很不容易,。該項目立項起點高,思路好,,緊密結合了科學研究與國民經(jīng)濟發(fā)展中實際需要解決的問題,,因而研究成果能很快與企業(yè)結合,走近產(chǎn)業(yè)化并促進產(chǎn)業(yè)化的進程,。希望成果應用得更深入更廣泛,,從蔬菜水果安全到國土安全,再延伸到保障食品安全,。
有意受讓該項成果的北京佳農(nóng)新貿(mào)易發(fā)展有限公司董事長丁毅先生表示,,參加該項具有我國獨立知識產(chǎn)權的成果鑒定會很受鼓舞,同時也為鑒定專家們認真的科學態(tài)度和嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L而很受感動,。他表示將與中國農(nóng)業(yè)科學院生物技術所的領導專家們共同努力,,加速該項成果應用的延伸。
中國農(nóng)業(yè)科學院生物技術研究所林敏所長代表該項成果的完成單位,,感謝科技部等國家有關部委多年來給予生物所的支持,,感謝與會專家們提出的諸多切實可行的建議,并表示將根據(jù)專家們的建議,,積極組織力量,,進一步加強該項成果的后續(xù)研究工作,密切與企業(yè)的聯(lián)系和合作,培育市場,,滿足國家社會發(fā)展環(huán)境保護的需求,,為可持續(xù)發(fā)展做出貢獻。