2006年3月14日,由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所主持完成,、由國家“863”計劃項目支持的“有機磷農(nóng)藥降解酶制劑的研制”項目成果通過了專家鑒定。受農(nóng)業(yè)部科教司委托,,中國農(nóng)科院科技局袁學(xué)志副局長主持了鑒定會,,科技部生物技術(shù)發(fā)展中心王德平處長,中國農(nóng)科院翟虎渠院長,、范云六院士以及我院生物技術(shù)所的領(lǐng)導(dǎo)和有意受讓該項成果的企業(yè)負責人等參加了鑒定會,。
由金鑒明院士等專家組成的鑒定委員會,認真聽取了課題主持人伍寧豐研究員的技術(shù)報告,,仔細審閱了相關(guān)技術(shù)資料,,一致認為:
1.該研究從被污染的土壤中篩選了一株能夠降解多種有機磷農(nóng)藥的細菌C2-1,經(jīng)鑒定為假產(chǎn)堿假單胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes),,分離純化了其分泌的有機磷降解酶OPHC2,,此酶具有優(yōu)良的酶學(xué)性質(zhì)。
2.從篩選到的有機磷降解菌中克隆了有機磷降解酶的編碼基因ophc2,,其核苷酸序列與已發(fā)表的同類基因相比最高同源性只有46.4%,,表明是一個新的有機磷降解酶基因,具有自主獨立知識產(chǎn)權(quán),。此基因已申請國家發(fā)明專利,。
3.本研究在國際上首次成功地利用畢赤酵母(Pichia pastoris)來高效表達有機磷降解酶,可通過高細胞密度發(fā)酵低成本生產(chǎn)有機磷降解酶制劑,。其優(yōu)勢在于:(1)高效表達,有機磷降解酶的表達量達到6g/L,,酶活性為1.6 X 104U/mL發(fā)酵液,,這是國內(nèi)外目前報道的有機磷降解酶最高的表達量。(2)表達有機磷降解酶的重組畢赤酵母具有良好的安全性,,無抗藥性標記,,培養(yǎng)過程中不分泌有毒物質(zhì)和熱源。(3)利用分泌表達載體使有機磷降解酶成功分泌到胞外,,簡化了酶的后加工工藝,,降低了成本。上述工藝技術(shù)已申請國家發(fā)明專利,。
4.在中試水平上(3噸發(fā)酵罐)確立了利用基因工程酵母菌生產(chǎn)有機磷降解酶的穩(wěn)定的發(fā)酵工藝,,其發(fā)酵方法簡單易行,發(fā)酵原料易得,,技術(shù)指標優(yōu)越,,產(chǎn)率高,為下一步的有機磷降解酶的產(chǎn)業(yè)化奠定了基礎(chǔ),。
5.重組畢赤酵母表達的有機磷降解酶具有良好的酶學(xué)性質(zhì),,最適反應(yīng)溫度為65℃,最適反應(yīng)pH為9.0。有機磷降解酶的應(yīng)用實驗表明,,對多種有機磷農(nóng)藥制劑和軍用神經(jīng)毒劑均具有明顯的降解效果,,其中對甲基對硫磷和氧化樂果的降解率達到95%以上,具有很好的應(yīng)用潛力,。
鑒定委員會專家一致認為,,該項目研究方法科學(xué)合理、技術(shù)路線正確,、資料齊全,、數(shù)據(jù)可信,思路嚴謹清晰,,實驗扎實細致,,成績出色顯著,該成果居國際領(lǐng)先水平,。這項擁有我國自主知識產(chǎn)權(quán)科研創(chuàng)新成果,,結(jié)合理論與實踐,結(jié)合前瞻性研究與解決國計民生問題,,并從解決食品安全延伸擴大到解決生態(tài)環(huán)境安全,,對我國食品安全和生態(tài)環(huán)境保護具有巨大的應(yīng)用前景。
鑒定委員會專家建議有關(guān)部門盡快組織生產(chǎn)性試驗,,政府要進一步予以政策和經(jīng)費支持,,企業(yè)宜從長遠目標出發(fā),努力成為科技創(chuàng)新的主體,,政府,、企業(yè)和科研單位一起共同努力,加快產(chǎn)業(yè)化步伐,,使科技成果迅速轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力,。
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院翟虎渠院長在講話中指出,由于化學(xué)方法存在諸多弊端,,解決環(huán)境污染的問題還要依靠生物技術(shù),。該項研究成果為產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)和解決重大國計民生問題奠定了良好的基礎(chǔ)。在范云六院士的帶領(lǐng)和指導(dǎo)下,,課題組全體研究人員奮力拼搏,,通過酶制劑的成功研制在農(nóng)業(yè)應(yīng)用微生物領(lǐng)域做出了重大貢獻。
科技部生物技術(shù)發(fā)展中心王德平處長在發(fā)言中指出,,生物技術(shù)研究周期長,,面臨的問題復(fù)雜,受到的影響因素多,,在大家的共同努力下,,該項研究能取得今天的成績很不容易。該項目立項起點高,思路好,,緊密結(jié)合了科學(xué)研究與國民經(jīng)濟發(fā)展中實際需要解決的問題,,因而研究成果能很快與企業(yè)結(jié)合,走近產(chǎn)業(yè)化并促進產(chǎn)業(yè)化的進程,。希望成果應(yīng)用得更深入更廣泛,,從蔬菜水果安全到國土安全,再延伸到保障食品安全,。
有意受讓該項成果的北京佳農(nóng)新貿(mào)易發(fā)展有限公司董事長丁毅先生表示,,參加該項具有我國獨立知識產(chǎn)權(quán)的成果鑒定會很受鼓舞,同時也為鑒定專家們認真的科學(xué)態(tài)度和嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)而很受感動,。他表示將與中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)所的領(lǐng)導(dǎo)專家們共同努力,,加速該項成果應(yīng)用的延伸。
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所林敏所長代表該項成果的完成單位,,感謝科技部等國家有關(guān)部委多年來給予生物所的支持,,感謝與會專家們提出的諸多切實可行的建議,并表示將根據(jù)專家們的建議,,積極組織力量,,進一步加強該項成果的后續(xù)研究工作,密切與企業(yè)的聯(lián)系和合作,,培育市場,,滿足國家社會發(fā)展環(huán)境保護的需求,為可持續(xù)發(fā)展做出貢獻,。