一,、步驟

1,、制備細(xì)胞懸液：對于懸液培養(yǎng)的細(xì)胞，可直接進行下面的步驟2（計數(shù)與計算過程）,。如果計數(shù)對象為貼壁生長的細(xì)胞,，首先需將培養(yǎng)物按如下步驟制備成細(xì)胞懸液。

1）,、終止培養(yǎng),，將培養(yǎng)液吸出，用PBS洗培養(yǎng)物一次,。

2）,、給培養(yǎng)瓶內(nèi)加入1ml 0.25％胰蛋白酶溶液，于37℃消化3～5min ,。期間不斷在鏡下觀察,。當(dāng)細(xì)胞變圓接近脫壁時,，棄消化液,。

3）,、加入一定量的培養(yǎng)液（如果這些培養(yǎng)細(xì)胞不再有用，可加PBS）,，用吸管吹打,，使細(xì)胞脫壁而制成細(xì)胞懸液。

2,、計數(shù)與計算過程

1）,、在細(xì)胞計數(shù)板中央放置計數(shù)專用的蓋玻片。

2）,、用玻璃虹吸管吸取細(xì)胞,，讓虹吸管在蓋玻片上或下側(cè)的計數(shù)板凹蹧處流出懸液，至蓋玻片被液體充滿為止,。

3）,、置顯微鏡下計數(shù)四角大方格內(nèi)的細(xì)胞總數(shù)。對于壓線的細(xì)胞只計數(shù)在上線和左線者,，對于細(xì)胞團按單個細(xì)胞計數(shù),。

4）、按下式計數(shù)細(xì)胞懸液的密度：細(xì)胞密度＝（4個大格細(xì)胞總數(shù)/4）×104個/ml ,。

二,、注意事項：

1）、務(wù)必使分散成單個細(xì)胞,，取樣計數(shù)前,，充分混勻細(xì)胞懸液。

2）,、顯微鏡下計數(shù)時,，遇到2個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團，應(yīng)按單個細(xì)胞計算,。如果細(xì)胞團>10％,，說明細(xì)胞分散不充分。


上海愛寶醫(yī)療還供應(yīng)鉛防護服,、連體鉛衣,、分體鉛衣、鉛短圍裙,、鉛手套,、鉛帽、鉛面罩,、鉛圍脖,、鉛三角巾、鉛三角褲,、鉛屏風(fēng),、鉛眼鏡,、血細(xì)胞計數(shù)器、骨髓細(xì)胞計數(shù)器,、機械式血細(xì)胞計數(shù)器,、電子式血細(xì)胞計數(shù)器、血細(xì)胞計數(shù)板,、三通道計時器,、灌腸器、巧致灌腸器,、握力計,、臺階測試儀、身高測試儀,。