一,、步驟
1,、制備細(xì)胞懸液:對(duì)于懸液培養(yǎng)的細(xì)胞,可直接進(jìn)行下面的步驟2(計(jì)數(shù)與計(jì)算過(guò)程)。如果計(jì)數(shù)對(duì)象為貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,,首先需將培養(yǎng)物按如下步驟制備成細(xì)胞懸液,。
1)、終止培養(yǎng),,將培養(yǎng)液吸出,,用PBS洗培養(yǎng)物一次。
2),、給培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,,于37℃消化3~5min 。期間不斷在鏡下觀察,。當(dāng)細(xì)胞變圓接近脫壁時(shí),,棄消化液。
3),、加入一定量的培養(yǎng)液(如果這些培養(yǎng)細(xì)胞不再有用,,可加PBS),用吸管吹打,,使細(xì)胞脫壁而制成細(xì)胞懸液,。
2、計(jì)數(shù)與計(jì)算過(guò)程
2)、用玻璃虹吸管吸取細(xì)胞,,讓虹吸管在蓋玻片上或下側(cè)的計(jì)數(shù)板凹蹧處流出懸液,,至蓋玻片被液體充滿為止。
3),、置顯微鏡下計(jì)數(shù)四角大方格內(nèi)的細(xì)胞總數(shù),。對(duì)于壓線的細(xì)胞只計(jì)數(shù)在上線和左線者,對(duì)于細(xì)胞團(tuán)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)數(shù),。
4),、按下式計(jì)數(shù)細(xì)胞懸液的密度:細(xì)胞密度=(4個(gè)大格細(xì)胞總數(shù)/4)×104個(gè)/ml 。上海愛(ài)寶醫(yī)療供應(yīng)鉛防護(hù)服,、連體鉛衣,、分體鉛衣、鉛短圍裙,、鉛手套、鉛帽,、鉛面罩,、鉛圍脖、鉛三角巾,、鉛三角褲,、鉛屏風(fēng),、鉛眼鏡、血細(xì)胞計(jì)數(shù)器,、骨髓細(xì)胞計(jì)數(shù)器,、機(jī)械式血細(xì)胞計(jì)數(shù)器、電子式血細(xì)胞計(jì)數(shù)器,、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,、三通道計(jì)時(shí)器、巧致灌腸器,、握力計(jì),、臺(tái)階測(cè)試儀、身高測(cè)試儀,。
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