1、涂片法是將材料均勻地涂布在載玻片上的一種制片方法,。
涂片材料有單細(xì)胞生物,、小型藻類、血液,、細(xì)菌培養(yǎng)液、動植物的疏松組織,、精巢,、花藥等。
涂片時應(yīng)注意:(1)載玻片必須清潔,。(2)載玻片要持平,。(3)涂層須均勻。涂抹液滴在載玻片中間偏右,,用解剖刀刃或牙簽等涂勻,。(4)涂層要薄。用另一載玻片作推片,,沿滴有涂抹液的載玻片面(二載玻片夾角應(yīng)為30°-45°)由右向左輕輕推動,,涂成均勻一薄層。(5)固定,。如需固定可用化學(xué)固定劑或干燥法(細(xì)菌)固定,。(6)染色,。細(xì)菌用亞甲基藍(lán),血液用瑞氏染液,有時可以可以使用碘酒,。染色液要蓋住全部涂面,。(7)沖洗。用吸水紙吸干或烤干,。(8)封片,。長期保存用加拿大的樹膠封片。
2,、壓片法是將生物材料置于載玻片和蓋片之間,,施加一定壓力,將組織細(xì)胞壓散的一種制片方法
3,、裝片法是將生物材料采取整體封固制成玻片標(biāo)本的方法,,用此法可制成臨時或永久性裝片。
裝片材料有:微小生物如衣藻,、水綿,、變形蟲、線蟲,;水螅,,植物的葉表皮;昆蟲的翅,、足,、口器,人的口腔上皮細(xì)胞等,。
裝片法制作時應(yīng)注意:(1)手持載玻片時,,應(yīng)注意持平,或放在平臺上,。滴水時水量要適當(dāng),,以恰好被蓋玻片蓋滿為度。(2)應(yīng)將材料用解剖針或鑷子展開不使重疊,,展平在同一平面上,。(3)放蓋玻片時,從一側(cè)慢慢蓋在水滴上,,防止出現(xiàn)氣泡,。(4)染色時,將一滴染色液滴在蓋玻片的一側(cè),,用吸水紙從另一側(cè)吸引,,使蓋玻片下的標(biāo)本均勻著色。著色后,,用同樣的方法,,滴一滴清水,,把染色液吸出后,在顯微鏡下觀察,。
4,、切片 是用從生物體上切取的薄片制成的玻片標(biāo)本。
因要求不同,,可用刀片進(jìn)行徒手切片,,也可將組織塊包埋于石蠟或火棉膠中或以低溫冰凍,用切片機(jī)切片,。切成5~10微米薄片,,供光學(xué)顯微鏡觀察。用環(huán)氧樹脂或甲基丙烯酸包埋組織塊切制的超薄切片,,其厚度在20~50納米,,專供在電子顯微鏡下觀察。一般教學(xué)用的如根尖,、莖的切片通稱石蠟切片,。
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