計算 

（1）16×25的計數(shù)板   

孢子數(shù)（個/g）=(N/100) ×400×10000×(V/G)=4×104×(NV/G)…………（1） 

                       式中  N——100小格內(nèi)孢子總數(shù) （個） 

                             V——孢子稀釋液體積 （ml） 

                             G——樣品重量  （g） 

（2） 25×16的計數(shù)板 

孢子數(shù)（個/g）=(N/80) ×400×10000×(V/G)=5×104×(NV/G) …………………………（2） 

                       式中  N——80小格內(nèi)孢子總數(shù) （個） 

                             V——孢子稀釋液體積 （ml） 

                             G——樣品重量 （g）

1．將血細(xì)胞計數(shù)實驗結(jié)果填入下表,。

計 算

次 數(shù) 4個大方格白細(xì)胞數(shù) 5個大方格紅細(xì)胞數(shù)

1 2 3 4 總數(shù) 1 2 3 4 5 總數(shù)

第1次

第2次

兩次平

均總數(shù)

血細(xì)胞

計  數(shù)

4．充液

2類血細(xì)胞計數(shù)分2次充液,，方法如下。

（1）取干凈的計數(shù)板平放于實驗桌上,，將蓋玻片置入計數(shù)板正中央,。★計數(shù)板和蓋玻片在使用前必須用軟綢或擦鏡紙擦凈,，并在低倍鏡下檢查計數(shù)室是否干凈,，其刻度是否清晰。用小滴管吸取稀釋血液,，并將管尖輕輕斜置于蓋玻片邊緣,，讓稀釋血液緩慢流出,，借毛細(xì)管現(xiàn)象而自動流入計數(shù)室內(nèi)。一般應(yīng)一次充液使計數(shù)室內(nèi)充滿稀釋血液,，若經(jīng)幾次充液,，易形成氣泡，應(yīng)洗凈計數(shù)板和蓋玻片,，干燥后重新充液,。

（2）稀釋的血液充入計數(shù)室后，靜置2～3min,，待細(xì)胞不再浮動后,，于低倍鏡下計數(shù)。

5．計數(shù)

為防止重復(fù)計數(shù)和漏數(shù),，計數(shù)時應(yīng)遵循一定的順序進(jìn)行,，即“從左到右，自上而下”,；對正好壓在格線上的血細(xì)胞,，依照“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的原則進(jìn)行計數(shù)（圖3-2）,。

如計數(shù)白細(xì)胞時發(fā)現(xiàn)各大方格的白細(xì)胞數(shù)相差8個以上,，計數(shù)紅細(xì)胞時發(fā)現(xiàn)各中方格的紅細(xì)胞數(shù)最多與最少相差20個以上時，則表示血細(xì)胞分布不均勻,，必須將稀釋的血液搖勻后再重新充入計數(shù)室計數(shù),。

6．計算

（1）白細(xì)胞數(shù)  將四角的4個大方格內(nèi)數(shù)得的白細(xì)胞總數(shù)乘以50，即得每立方毫米血液內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù),，也可將對角兩個大方格內(nèi)數(shù)得的白細(xì)胞總數(shù)乘以100,。因為：

稀釋液0.38mL加入血液20mm3（1mL＝1000mm3，

故20mm3＝0.02mL,）,，使血液稀釋20倍,，換算成未稀釋血時應(yīng)乘以20。

在計數(shù)時僅統(tǒng)計四角的4個大方格內(nèi)的白細(xì)胞,，其容積為lmm×1mm×0.1mm×4＝0.4mm3,，換算成每立方毫米時應(yīng)乘以2.5。這樣,，把四角4個大方格內(nèi)數(shù)得的白細(xì)胞總數(shù)乘以50（即20×2.5＝50），即得每立方毫米血內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù),。

（2）紅細(xì)胞數(shù)  將中央大方格中的四角和中央的中方格共5個中方格內(nèi)數(shù)得的紅細(xì)胞總數(shù)乘以10 000,，即得每立方毫米血內(nèi)紅細(xì)胞的總數(shù)。因為：

稀釋液3.98mL,，加入血20mm3（即0.02mL）,，使血液稀釋200倍，換算成未稀釋血時應(yīng)乘以200。

在計數(shù)時僅統(tǒng)計0.02 mm3內(nèi)的紅細(xì)胞（1個中方格的容積為0.2mm×0.2mm×0.1mm＝0.004mm3,，5個中方格的容積為0.004mm3×5＝0.02mm3）,，換算成每立方毫米時應(yīng)乘以50。這樣把5個中方格內(nèi)數(shù)得的紅細(xì)胞總數(shù)乘以10 000（即200×50＝10000）,，即得每立方毫米血內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù)。

（3）按目前臨床上血細(xì)胞計數(shù)采用的通用單位,，將以上所獲每毫升血液中所含各血細(xì)胞數(shù)量換算為各血細(xì)胞在每升血液中的數(shù)量。

7．清洗血細(xì)胞計數(shù)板

蓋玻片及計數(shù)板用過之后,，必須立即用水沖洗，但不可用硬物刷洗,。計數(shù)板晾干或吹風(fēng)機(jī)吹干后，應(yīng)鏡檢計數(shù)室是否干凈,，如不干凈必須重復(fù)洗至干凈為止。

 

 

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