本報(bào)上海5月29日電 抗病毒“神藥”達(dá)菲一直是H7N9病毒的有效“克星”，但復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任,、上海市（復(fù)旦大學(xué)附屬）公共衛(wèi)生臨床中心兼職教授袁正宏研究員領(lǐng)銜的應(yīng)急檢測與生物安全實(shí)驗(yàn)室新發(fā)傳染病研究團(tuán)隊(duì)的一項(xiàng)“跟蹤”科研成果證實(shí)：個(gè)別患者在達(dá)菲抗病毒治療19天后仍在其咽拭子標(biāo)本中檢測到H7N9病毒的重要組成部分“核酸”,，這表明該病毒已出現(xiàn)基因突變和耐藥趨勢。5月29日,，該成果已在線發(fā)表在國際頂尖醫(yī)學(xué)雜志《柳葉刀》（Lancet）上,，引起世界同行高度關(guān)注。
為指導(dǎo)人感染H7N9禽流感病例病情判斷,、臨床治療及病人出院等工作,，袁正宏領(lǐng)銜的研究團(tuán)隊(duì)承擔(dān)了檢測收治患者標(biāo)本中H7N9病毒“核酸”載量的重要任務(wù)。在上海市（復(fù)旦大學(xué)附屬）公共衛(wèi)生臨床中心應(yīng)急病房醫(yī)護(hù)人員的配合,、支持下,，該團(tuán)隊(duì)收集了病人在治療過程中多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的咽拭子、血液,、尿液和糞便標(biāo)本,，使用先進(jìn)的、自行設(shè)計(jì)的熒光定量RT-PCR方法對上述標(biāo)本中的H7N9流感病毒“核酸”載量進(jìn)行了定量檢測,，并對其中14例患者進(jìn)行了病毒載量與病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性分析,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，病癥相對較輕的患者在達(dá)菲治療中,，咽拭子的病毒載量顯著下降并較快轉(zhuǎn)陰,；而重癥患者，特別是在后期需要依靠人工肺治療的患者,，其咽拭子的病毒核酸載量在達(dá)菲治療過程中呈持續(xù)陽性,、甚至載量進(jìn)一步升高的罕見現(xiàn)象，并有個(gè)別患者在達(dá)菲抗病毒治療19天后仍在其咽拭子標(biāo)本中檢測到了H7N9病毒的重要組成部分“核酸”,。
為解釋上述不尋?，F(xiàn)象，課題負(fù)責(zé)人袁正宏研究員率領(lǐng)應(yīng)急實(shí)驗(yàn)室主任胡蕓文博士與王蔚,、宋志剛等骨干對H7N9禽流感病毒的兩個(gè)最重要蛋白HA和NA,，即患者標(biāo)本中的這兩個(gè)病毒基因序列進(jìn)行擴(kuò)增研究和多態(tài)性分析， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩例重癥病例在抗病毒治療過程中其體內(nèi)H7N9毒株的神經(jīng)氨酸酶（NA）“292位氨基酸”從R（精氨酸）突變?yōu)镵（賴氨酸）。也就是說,，在治療早期,，292位是R，而治療后期這一位點(diǎn)卻呈現(xiàn)為K,。
更重要的是,，該實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用先進(jìn)的“Q-PCR單核酸多態(tài)性分析法”，結(jié)果有了更為重大的發(fā)現(xiàn)：病人標(biāo)本中“292R毒株”竟然出現(xiàn)了逐漸被“292K毒株”取代的過程,。該結(jié)果提示：這一突變毒株的出現(xiàn)可能與達(dá)菲治療效果不佳有關(guān),。
袁正宏團(tuán)隊(duì)聯(lián)想到“NA R292K”的突變曾出現(xiàn)在季節(jié)性H3N2流感病毒上，以后研究證明該病毒對達(dá)菲耐藥,，更為巧合的是,，該團(tuán)隊(duì)在上海地區(qū)最早出現(xiàn)的H7N9病毒中也發(fā)現(xiàn)存在這一突變，但當(dāng)時(shí)一直不清楚其臨床意義,。本研究的重大意義在于首次將“NA 292位”氨基酸的“R/K突變”與臨床達(dá)菲療效不佳和不良預(yù)后聯(lián)系起來,，并表明耐藥的基因突變可以在臨床抗病毒治療過程中被誘導(dǎo)產(chǎn)生，即病毒在藥物“壓力”下,，會(huì)促使患者體內(nèi)病毒產(chǎn)生變異突變,，從而導(dǎo)致H7N9禽流感病毒已呈現(xiàn)耐藥性。香港大學(xué)微生物學(xué)家裴偉士教授的科研團(tuán)隊(duì)參與了耐藥基因的發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)工作,。
上海市H7N9禽流感防治專家組組長,、微生物學(xué)專家聞?dòng)衩吩菏空J(rèn)為,，該研究結(jié)果說明,，達(dá)菲治療依然對絕大部分患者有效，一旦確診應(yīng)盡早治療,；同時(shí)提示在達(dá)菲治療前和治療過程中必須要對病毒載量和耐藥“基因位點(diǎn)”進(jìn)行密切監(jiān)測,，及時(shí)調(diào)整治療方案，以提高救治成功率,；此外,，加快新藥研發(fā)顯得尤為重要。
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