醫(yī)療器械滅菌效果的監(jiān)測
20.4.1 采樣時間：在滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣,。
20.4.2 常規(guī)監(jiān)測
(1) 檢測方法：用無菌的方法將擬檢縫合針,、針頭、手術(shù)刀片等小件醫(yī)療器械各5支,，分別投人5ml的無茵洗脫液中,；注射器則取5副在5ml無菌肉湯中分別抽吸5 次；手術(shù)鉗,、鑷子等大的醫(yī)療器械在無菌操作下取2份以上用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復(fù)涂擦采樣,，并將棉拭子投入5ml無菌洗脫液中,。將采樣管用力振打80 次，用無菌吸管吸取lml待檢樣品放于滅菌平皿內(nèi),，加人已熔化的45℃-48℃的營養(yǎng)瓊脂15-18ml,，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固,，置37℃溫箱培養(yǎng) 48h,，計數(shù)菌落數(shù)。
(2)結(jié)果判定：平板上無菌生長為滅菌合格,。
(3)注意事項：若消毒因子為化學(xué)消毒劑時,，采樣液中應(yīng)加人相應(yīng)中和劑。
20.4.3 無菌檢驗
20.4.3.1 無菌檢驗前準(zhǔn)備20.4.3.2 無菌操作：取縫合針,、針頭,、刀片等小件醫(yī)療器械5件直接浸人6管需一厭氧培養(yǎng)管(其中一管作陽性對照)與4管霉菌培養(yǎng)管C培養(yǎng)基用量為15ml/管。
取 5副注射器,，在5ml洗脫液中反復(fù)抽吸5次,，洗下管內(nèi)細(xì)菌，混和后接種需一厭養(yǎng)菌培養(yǎng)管(共6管,，其中1管作陽性對照)與霉菌培養(yǎng)管(共4管),。接種量：lml注射器為0.5ml，2ml注射器為Iml,，5-10ml注射器為2ml,，20-50ml注射器為5ml，培養(yǎng)基用量：接種量為2ml以下為 15ml/管,，接種量5ml為40ml/管,。
手術(shù)鉗、鑷子等大件醫(yī)療器械取2件用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復(fù)涂抹采樣,，將棉拭子投人sml無菌洗脫液中,，將采樣液混勻，接種于需一厭氧培養(yǎng)管(共6管,，其中1管作陽性對照)與霉菌培養(yǎng)基(共4管),。接種量為lml/管，培養(yǎng)基用量為15ml/管,。
20.4.3.3 培養(yǎng)：在待檢樣品的需一厭氧培養(yǎng)管中,，接種預(yù)先準(zhǔn)備的金黃色葡萄球菌陽性對照管液1：1000稀釋1ml，將需一厭氧培養(yǎng)管以及陽性與陰性對照管均于 30-35℃培養(yǎng)5天,，霉菌培養(yǎng)管與陰性對照管于20-25℃培養(yǎng)7天,，培養(yǎng)期間逐日檢查是否有菌生長，如加人供試品后培養(yǎng)基出現(xiàn)混濁或沉淀,，經(jīng)培養(yǎng)后不能從外觀上判斷時,，可取培養(yǎng)液轉(zhuǎn)種人另一支相同的培養(yǎng)基中或斜面培養(yǎng)基上,，培養(yǎng)48-72h后，觀察是否再現(xiàn)混濁或在外面上有無菌落生長,，并在轉(zhuǎn)種的同時,，取培養(yǎng)液少量，涂片染色,，用顯微鏡觀察是否有菌生長,。
20.4.3.4 結(jié)果判定：陽性對照在24h內(nèi)應(yīng)有菌生長，陰性對照在培養(yǎng)期間應(yīng)無菌生長,，如需一厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管內(nèi)均為澄清或更顯混濁但經(jīng)證明并非有菌生長,，判為滅菌合格；如需一厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管中任何1管顯混濁并證實有菌生長,，應(yīng)重新取樣,，分別同法復(fù)試2次，除陽性對照外,，其他各管均不得有菌生長,，否則判為滅菌不合格。
20.4.4 注意事項
(1)送檢時間不得超過6h,，若樣品保存于0-4℃,，則不超過24h。
(2)被采樣本表面積<100cm2取全部表面,；被采樣本表面積 ≥ 100Cm2,，取 100cm2。
(3)若消毒因子為兒學(xué)消毒劑,，采樣液中應(yīng)加人相應(yīng)中和劑,。
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